Megazyme K-CellG5 纤维素酶检测试剂盒

Megazyme K-CellG5 纤维素酶检测试剂盒

货号:K-CellG5

中文品名:纤维素酶检测试剂盒[CellG5法]

品名:Cellulase Assay Kit (CellG5 Method)

规格1:K-CellG5-4V 120/240次(手工)/480次(自动分析仪)
规格2:K-CellG5-2V 60/120次(手工)/240次(自动分析仪)

说明:CellG5检测试剂盒用于检测纤维素内切酶(1,4 -β-葡聚糖内切酶)包含两种组分:1) 4,6-O-(3-Ketobutylidene)-4-nitrophenyl-β-D-cellopentaoside (BPNPG5) 和 2)热稳定的β-葡萄糖苷酶。 酮阻断基团可阻止β-葡萄糖苷酶对BPNPG5的水解。通过纤维素内切酶的培养可生成非阻断的显色寡糖,被β-葡萄糖苷酶迅速水解。产生4-硝基苯酚的速率与β-葡萄糖苷酶水解BPNPG5直接相关。加入Tris缓冲液(pH 9.0)后可终止反应,并形成苯酚显色产物。
CellG5检测法代表了代表了纤维素酶测量方法的巨大进步。传统的纤维素酶检测依赖于酶底物,例如羧甲基纤维素,微晶纤维素,纤维低聚糖,CMC滤纸,染色多糖,包括CMC刚果红或纤维素天青。

应用:纤维素酶检测试剂盒[CellG5法]。

原理:
比色法测定酶制剂、发酵产品中1,4 -β-葡聚糖内切酶(纤维素酶)的含量。
纤维素酶检测试剂盒 (K-CellG5)检测原理
检测方法:分光光度法 @400 nm
反应时间:10min
检测限:3.5 x 10-4 U/mL
应用案例:
发酵液,工业酶制剂和生物燃料研究。
方法识别:
新方法
试剂盒组成:
Bottle 1: (x2) 或 (x4) 每瓶含有4,6-O-(3-Ketobutylidene)-4-nitrophenyl-β-D-cellopentaoside (BPNPG5)溶于3毫升含有0.02% w/v叠氮钠的10% DMSO水溶液。
-20°C下稳定超过4年。
Bottle 2: (x 2) 热稳定的β-葡萄糖苷酶(0.50 mL, 600 U/mL)溶于含有0.02% w/v叠氮钠的 50% w/v 硫酸铵溶液。
4°C下稳定超过4年。
Bottle 3: 木霉纤维素酶标准溶液 (5 mL, ~ 3 U/mL; 准确至见瓶标签) 溶于含有0.02% w/v叠氮钠的50% 的丙三醇水溶液。
-20°C下稳定超过4年。

优点:

所有试剂可稳定超过4年
价格非常具有竞争力
完全针对纤维素酶(1,4-葡聚糖内切酶)
常规操作,非常灵敏
检测方法十分简单,适合仪器分析
包含标准
参考文献:
Novel substrates for the measurement of endo-1,4-β-glucanase (endo-cellulase). McCleary, B. V., Mangan, D., Daly, R., Fort, S., Ivory, R. & McCormack, N. (2014). Carbohydrate Research, 385, 9-17.
Quantitative fluorometric assay for the measurement of endo-1,4-β-glucanase. Mangan, D., McCleary, B. V., Liadova, A., Ivory, R. & McCormack, N. (2014). Carbohydrate Research, 395, 47-51.
A novel automatable enzyme-coupled colorimetric assay for endo-1,4-β-glucanase (cellulase). Mangan, D., Cornaggia, C., McKie, V., Kargelis. T. & V. McCleary, B. V. (2016). Analytical and Bioanalytical Chemistry, 408(15), 4159-4168.
说明书下载地址:https://secure.megazyme.com/files/Booklet/K-CellG5_DATA.pdf

Megazyme K-CELLG3 内切纤维素酶检测试剂盒

Megazyme K-CELLG3 内切纤维素酶检测试剂盒

Megazyme代理,部分现货,期货产品2-3周

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英文名:Cellulase Assay Kit (CELLG3 Method)

货号:K-CELLG3

规格:180 / 360 assays per kit / 720 (auto-analyser)

市场价: 5537

 纤维素酶是一种重要的酶产品,是一种复合酶,主要由外切β-葡聚糖酶、内切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等组成,还有很高活力的木聚糖酶。

提供内切纤维素酶检测试剂盒,色度法(400 nm)测定酶制品和发酵产品中的纤维素酶(内切-1,4-β-葡聚糖酶)。

内切纤维素酶检测试剂盒(CELLG3方法) K-CELLG3

使用高纯度β-葡萄糖苷酶和苯亚甲基阻断,2 – 氯-4 – 硝基苯基-β-Dcellotrioside(BClPNPβ-G3)。 β-葡萄糖苷酶的能力确保测定的可靠的最大的灵敏度。BClPNPβ-G3的水解为苯亚甲基,通过纤维素酶阻断纤维二糖和2-氯-4 -硝基苯基-β-D-葡萄糖, 2-Cl-4-硝基苯基-β-D-葡萄糖通过β-葡萄糖苷酶立即裂解为D-葡萄糖和游离的2 – 氯-4 – 硝基苯酚(ClPNP)。

反应时间:16min

适用样品:酶制品和发酵产品

优点:

价格低廉(每次检测成本)

特异性高

方法简单

包含标准品

 

The CELLG3 assay reagent for the measurement of endo-cellulase (endo-1,4-β-glucanase) contains two components;

1) 4,6-O-benzylidene-2-chloro-4-nitrophenyl-β-D-cellotrioside (BCNPG3) and 2) thermostable β-glucosidase. The benzylidene blocking group prevents any hydrolytic action by the β-glucosidase on BCNPG3.  Incubation with an endo-cellulase generates a non-blocked colourimetric oligosaccharide that is rapidly hydrolysed by the ancillary β-glucosidase.  The rate of formation of 2-chloro-4-nitrophenol is therefore directly related to the hydrolysis of BCNPG3 by the endo-cellulase.  The reaction is terminated and the phenolate colour is developed on addition of Tris buffer solution (pH 9.0).
Please note that a new assay kit (K-CELLG5) is now available for the measurement of endo-cellulase.  The CELLG5 reagent contains a cellopentaose core and exhibits vastly improved sensitivity for some cellulases.  In addition, the exchange of the benzylidene blocking group in CELLG3 for 3-keto-butylidene in CELLG5 improves the substrate’s water solubility significantly, allowing for a reduction in the concentration of DMSO required in the assay.  As DMSO is known to inhibit certain cellulases, this is another benefit in using CELLG5.  Megazyme now recommends the use of K-CELLG5 for all assays for the measurement of endo-cellulase.

Colourimetric method for the determination of 
endo
-1,4-β-glucanase (cellulase) in enzyme preparations and fermentationproducts

Principle:
(endo-1,4-β-glucanase)
(1) 3-Ketobutylidene-G5-β-PNP + H2O → Blocked-GX + G(5-X)-β-PNP

(thermostable β-glucosidase)
(2) G(5-X)-β-PNP + H2O → D-glucose + PNP

(alkaline solution)
(3) PNP → phenolate ion (yellow colour)
Note: PNP = 4-nitrophenol

Kit size:
K-CELLG5-4V 120 / 240 assays (manual) / 480 (auto-analyser)
or
K-CELLG5-2V 60 / 120 assays (manual) / 240 (auto-analyser)

Method:                         Spectrophotometric at 400 nm
Total assay time:           10 min
Detection limit:                3.5 x 10-4 U/mL
Application examples:
Fermentation broths, industrial enzyme preparations, biofuels research
Method recognition:     Novel method

 

Megazyme K-BGLU Beta葡聚糖[混联]检测试剂盒

Megazyme K-BGLU Beta葡聚糖[混联]检测试剂盒

Megazyme代理,部分现货,期货产品2-3周

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产品货号:K-BGLU

产品品名:β-葡聚糖[混联]检测试剂盒

英文品名:β-Glucan (Mixed Linkage) Assay Kit

规格型号:100 assays per kit

β-葡聚糖是用独特的工艺开发的一种新的产品,其来源于新鲜的食品啤酒酵母。它是一种多糖,主要化学结构β-1,3 葡聚糖和β-1,6葡聚糖,其中前者具有抗肿瘤性质,而且能够极大地提高人体自然免疫力。

上海金畔生物科技有限公司提供β-葡聚糖[混联]检测试剂盒,比色法(510nm)测定谷物、饲料、食品、饮料和其他原料中的B-葡聚糖。

原理:

总检测时间:100min

检测限:样品重量的0.5-100%

适用样品:燕麦、大麦、麦芽、麦芽汁、啤酒、食品以及其他原料

优点:

成本低

提供的所有试剂稳定性>2年

只有酶试剂盒可用

特异性高

方法简单

包含标准品

方法认证:AOAC (Method 995. 16)、AACC (Method 32-23),EBC (Methods 3.11.1,8.16.l 和 8.11. 1)  ICC(标准号l66),and RACI(标准方法)

分析物意义: 大麦和燕麦的主要细胞壁多糖 

Megazyme检测试剂盒优点:反应迅速、试剂稳定, 只有酶检测试剂盒可用。 AOAC方法 995.16; AACC 方法 32-23

AACC Method 32-23.01, AOAC Method 995.16, EBC Methods 3.11.1, 4.16.1 and 8.11.1, ICC Standard No. 166 and RACI standard method for the measurement of 1,3:1,4-ß-D-glucan in cereal grains, milling fractions, wort and beer. Recommended/Standard procedure of the Association of Official Analytical Chemists (AOAC), American Association of Cereal Chemists (AACC), Royal Australian Chemical Institute (RACI), European Brewing Convention (EBC), and International Association for Cereal Science and Technology (ICC). Content:100 assays per kit

Colourimetric method for the determination of β-Glucan in
cereal grains, feed, foodstuffs, beverages and other materials

Principle:
(lichenase)
(1) β-Glucan + H2O → β-gluco-oligosaccharides

(β-glucosidase)
(2) β-Gluco-oligosaccharides + H2O → D-glucose

(glucose oxidase)
(3) D-Glucose + H2O + O2 → D-gluconate + H2O2

(peroxidase)
(4) 2H2O2 + p-hydroxybenzoic acid + 4-aminoantipyrine →
quinoneimine + 4H2O

Kit size: 100 assays
Method: Spectrophotometric at 510 nm
Total assay time: ~ 100 min
Detection limit: 0.5-100% of sample weight
Application examples:
Oats, barley, malt, wort, beer, food and other materials
Method recognition:
AOAC (Method 995.16), AACC (Method 32-23.01), EBC (Methods
3.10.1, 4.16.1 and 8.13.1), ICC (Standard No. 166), RACI (Standard
Method) and CODEX (Type II Method)

Advantages

  • Very cost effective
  • All reagents stable for > 2 years as supplied
  • Only enzymatic kit available
  • Very specific
  • Simple format
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Standard included

REFERENCES:

  1. McCleary, B. V. and Glennie-Holmes, M. (1985). Enzymic quantification of (1-3)(1-4)-β-D-glucan in barley and malt. J. Inst. Brew. 91, 285-295.
  2. McCleary, B. V. and Nurthen, E. J. (1986). Measurement of (1-3)(1-4)-β-D-glucan in malt, wort and beer. J. Inst. Brew.92, 168-173.
  3. McCleary, B. V. and Codd, R. (1991). Measurement of (1-3) (1-4)-β-D-glucan in barley and oats: a streamlined enzymic procedure. J. Sci. Fd. Agric. 55, 303-312.
  4. McCleary, B. V. and Mugford, D. C. (1992). Interlaboratory evaluation of β-glucan analysis methods. In “The changing role of oats in human and animal nutrition”. Proceedings of the Fourth International Oat Conference, Adelaide, Australia. Oct 19-23.

Megazyme K-YBGL Beta葡聚糖[酵母和蘑菇]检测试剂盒

Megazyme K-YBGL Beta葡聚糖[酵母和蘑菇]检测试剂盒

Megazyme代理,部分现货,期货产品2-3周

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产品名称:Beta葡聚糖[酵母和蘑菇]检测试剂盒

英文名称:Mushroom and yeast beta-glucan assay Kit

货号: K-YBGL

型号规格:100次

优点:成本低;所有试剂配制后的稳定性〉2年;只有酶试剂盒可用;;方法简单;包含标准品

检测原理:

检测方法:比色法

检测波长:510nm;

总检测时间:100min;

检测限:样品重量的1-100%;

适用样品:酵母制备、蘑菇制备及其他原料;

方法认证:新方法

商品说明:

For the measurement of 1,3:1,6-ß-glucan and α-glucan in yeast preparations. Content: 100 assays per kit

Colourimetric method for the determination of Yeast and 
Mushroom β-Glucan in yeast, mushroom, foodstuffs and 
other materials

Principle:
(conc. HCl, 30°C, 45 min)
(1) 1,3:1,6-β-Glucan + 1,3-β-glucan + α-glucan + H2O → 
soluble glucan

(1.3 M HCl, 100°C, 2 h)
(2) Soluble glucan + H2O → D-glucose + laminarisaccharides (trace)

(exo-1,3-β-glucanase + β-glucosidase)
(3) Laminarisaccharides + H2O → D-glucose

(glucose oxidase)
(4) D-Glucose + H2O + O2 → D-gluconate + H2O2

(peroxidase)
(5) 2H2O2 + p-hydroxybenzoic acid + 4-aminoantipyrine → 
 quinoneimine + 4H2O

(amyloglucosidase)
(6) α-Glucan + H2O    →    D-glucose

Kit size:                            100 assays
Method:                            Spectrophotometric at 510 nm
Total assay time:              ~ 100 min
Detection limit:                 1-100% of sample weight
Application examples:
Yeast preparations, mushroom preparations and other materials
Method recognition:        Novel method

Advantages

  • Very cost effective
  • All reagents stable for > 12 months after preparation
  • Only enzymatic kit available
  • Simple format
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Standard included

Megazyme K-XYLOSE D-木糖检测试剂盒 D-Xylose assay Kit

Megazyme K-XYLOSE D-木糖检测试剂盒 D-Xylose assay Kit

产品名称:D-木糖检测试剂盒

英文名称:D-xylose including xylan and arabinoxylan assay kit

货号: K-XYLOSE

规格:80 assays (manual) / 800 assays (microplate)

优点:成本低;所有试剂配制后的稳定性〉2年;只有酶试剂盒可用;反应快;包含标准品

检测原理:

检测方法:紫外分光光度法

检测波长:340nm;

反应时间:30min;

检测限:2.96mg/L;

适用样品:发酵液、植物原料和多聚糖产物中的木糖的分析;

方法认证:新方法

商品说明:

The D-Xylose test kit is a novel method for the specific, convenient and rapid measurement and analysis of D-xylose in plant extracts, culture media/supernatants and other materials.

Suitable for manual, auto-analyser and microplate formats.

UV-method for the determination of D-Xylose in fermentation
broths and hydrolysates of plant material and polysaccharides

Principle:
(xylose mutarotase)
(1) α-D-Xylose ↔ β-D-xylose

(β-xylose dehydrogenase)
(2) β-D-Xylose + NAD+ → D-xylonic acid + NADH + H+

Kit size: 100 assays (manual) / 1000 (microplate)
/ 1300 (auto-analyser)
Method: Spectrophotometric at 340 nm
Reaction time: ~ 6 min
Detection limit: 0.7 mg/L
Application examples:
Analysis of D-xylose in fermentation broths and hydrolysates of plant
material and polysaccharides
Method recognition: Novel method

Advantages

  • Very cost effective
  • All reagents stable for > 2 years after preparation
  • Only enzymatic kit available
  • Rapid reaction (~ 6 min)
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Standard included
  • Suitable for manual, microplate and auto-analyser formats

Megazyme K-TSTA 淀粉总量检测试剂盒

Megazyme K-TSTA 淀粉总量检测试剂盒

Megazyme代理,部分现货,期货产品2-3周

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品牌:Megazyme

产品货号:K-TSTA

品牌:Megazyme

产品品名:淀粉总量检测试剂盒

英文品名:Total Starch (AA/AMG) Assay Kit

规格型号:100 assays per kit

商品说明:

淀粉总量检测试剂盒 Total Starch (AA/AMG) Assay Kit  使用说明:

简介:
     酸水解法和酶法被广泛的应用于淀粉含量测定,酸水解法仅仅适用于纯净的淀粉样品,应用范围有限。酶法的前处理步骤上有各种变化,经过凝胶、液化和糊精化作用,糊精水解生成葡萄糖,最终以测量的葡萄糖计算淀粉含量。AACC方法76-11特殊之处在于:在高压蒸汽和碱性环境下淀粉糊化成为凝胶,然后再用淀粉葡糖苷酶将淀粉转化为葡萄糖进行测量。AACC方法76-11会低估某些样品的淀粉含量,包括高多糖玉米淀粉和众多的经过加工的谷物产品。今天应用的众多的测定方法都使用了联合处理方法,如在样品处理过程中或直接在淀粉凝胶化后使用耐热α-淀粉酶。对于难凝胶的样品(如高多糖玉米淀粉)使用了氢氧化钠或二甲基亚砜作为溶剂。为确保膳食纤维中的淀粉能够全部溶解,Englyst和Cummings(1988)总结的处理方法中使用了去分支酶,支链淀粉酶。
    为了测量极端样品得到满意结果,兼顾数量和可靠性,Megazyme提供了一个总淀粉分析试剂盒,基于使用耐热性淀粉酶和淀粉葡糖苷酶。这一方法已被AOAC和AACC采用 (Method 76.13)。
    最近,耐热淀粉酶可在低pH环境下使用。因此,我们更新了我们的总淀粉测量方法加入了这种酶。这一改进的最大益处在于可以在同一pH(pH5.0)条件下进行耐热性淀粉酶和淀粉葡糖苷酶孵育,简化步骤以及减少麦芽酮糖(抗耐热性淀粉酶和淀粉葡糖苷酶水解)的产生。另一改进是使用己糖激酶/葡萄糖-6-磷酸脱氢酶/ NADP+在D-葡萄糖处理步骤(K-TSHK5)。Megazyme总淀粉分析方法可以测量广泛范围内食品,饲料,植物和谷类产品(自然的或加工的)。对于大多数样品(例如小麦面粉),淀粉可以在100°C抗耐热性淀粉酶处理步骤中完全可溶。包含高水平抗性淀粉(例如高多糖含量玉米淀粉)样品,需要先用冷2 M KOH 或 热DMSO进行预溶解。含可溶性淀粉和糊精的样品,无需进行抗耐热性淀粉酶处理。
原理:
     抗耐热性淀粉酶水解淀粉为可溶性分支麦芽糊精和去分支麦芽糊精。
样品中的抗性淀粉可用2M KOH进行预溶解,再用醋酸钠缓冲液进行中和再进行淀粉酶水解。或者用DMSO在100°C进行溶解。
淀粉葡萄糖苷酶水解麦芽糊精至D-葡萄糖。
D-葡萄糖氧化为D-葡萄糖酸脂,释放出(H2O2),再用过氧化氢酶催化进行显色反应,产生醌亚胺染料。
样品包含高水平的D-葡萄糖和麦芽糊精可以在分析前用80%乙醇进行洗涤。单个样品可在70分钟内完成测定。20个样品可在2小时内完成。
特异性,灵敏度,线性范围和精确性
此试剂盒专用于分析a-葡聚糖(包括淀粉,糖原,植物糖原和非抗性麦芽糊精)。
最小可区分的吸收值是0.01吸收值范围。这对应于1.0mg的D-葡萄糖(或0.9mg淀粉)/L在最大样品体积1ml。检测极限:2.0mgD-葡萄糖(或1.8mg淀粉)/L,这对应于0.02吸光度区别在最大体积1ml中。
此试剂盒在5-100ugD-葡萄糖范围内呈线性。一个样品溶液的重复测定中,吸收值会有0.005至0.010的波动。当样品体积为1ml时,这相当于0.05-1ml/L浓度的D-葡萄糖。如果样品在准备过程中被稀释,结果需要乘以稀释倍数。例如在样品准备时,样品称重,如10g/L,变异范围将在0.02至0.05g/100g。
干扰:
如果D-葡萄糖的转化在5分钟内完成,不会产生干扰。可以通过加入D-葡萄糖至反应完成后试管内(例如50ug在0.1ml)以检测干扰。可以看到吸光度显著上升。
样品内的干扰物质可以通过加入内标进行分析。可以对这标准进行定量校正。样品操作中的损失可以通过在起始步骤中加入D-葡萄糖进行校正。
试剂盒成分
Megazyme总淀粉含量测定试剂盒提供有足够运行100次试验的试剂,并提供有全部的试验方法:
瓶1: 耐热α-淀粉酶(10mL, 3,000U/mL在CERALPHA试剂中pH6.5; 40°C 或1600U/mL在CERALPHA试剂中pH5.0; 40°C)。稳定性>4年, 4°C保存。
瓶2: 淀粉葡糖苷酶(10mL, 3300U/mL在可溶性淀粉)(或200U/mL在p-nitrophenylβ-maltoside*,pH4.5,40°C)稳定性>4年, 4°C保存。
完整的分析程序可咨询客服。
瓶3: GOPOD试剂缓冲液。磷酸钾缓冲液(0.26M,pH7.4),对羟基苯甲酸(0.22M),叠氮化钠(0.4%W/V)稳定性>4年, 4°C保存。
 注意:
1. 如果GOPOD缓冲液存储在-20°C,会形成盐结晶,用双蒸水稀释至1L前必须完成溶解。
2. 此溶液含叠氮化钠(0.4%W/V),有毒。
瓶4: GOPOD试剂酶。葡萄糖氧化酶(> 12,000 U) 和过氧化物酶(> 650 U)和4-氨基安替比林(80mg)。冻干粉,稳定性>4年, -20°C保存。
瓶5: 葡萄糖标准溶液(5ml,1mg/mL)在0.2% W/V苯甲酸溶液中。稳定性>4年,室温保存。
瓶6: 标准的玉米淀粉。淀粉含量见标签。稳定性>4年, -20°C保存。
准备试剂溶液
溶液1  用试剂1(100mM醋酸钠缓冲液, pH5.0,自备)稀释1.0mL瓶1成分至30mL 。分成小份后冻存。稳定性>3年, -20°C保存。
注意:如果按照AOAC方法996.11(example b),用试剂4(50mM MOPS缓冲液,pH7.0)稀释酶。
溶液2  此酶不用稀释可以直接使用,由于酶溶液具有一定粘稠度,所以必须使用正确的移液器。4°C下保存,稳定性>3年。
溶液3  用蒸馏水稀释瓶3成分(GOPOD试剂缓冲液)到1L, 立即使用。
溶液4 用20ml溶液3溶解瓶4成分再倒回溶液3瓶子。铝箔纸包裹避光。这就是          葡萄糖测定试剂(GOPOD试剂) 稳定性: 4°C下保存,3个月;-20°C下保存,              12个月;
        分装成小份再进行冻存,只能冻融一次。
        新鲜配制的试剂呈浅黄色或浅紫色。4°C下保存2-3个月过程中,逐渐变成深紫色。用水为空白对照时,此溶液的吸光度<0.05。
溶液5&6 同瓶5&6
自备试剂
1.醋酸钠缓冲液(100mM, pH5.0) +氯化钙(5mM) 
     5.8ml冰醋酸(1.05g/mL)加入900mL蒸馏水,用1M(4g/100mL)NaOH调节pH到5.0,大约需要30mL。4°C下保存2个月.
     添加0.74g二水氯化钙完全溶解, 定容到1L,  4°C下保存>6个月。
注意:可通过添加叠氮化钠(0.2g/L)增加此缓冲液的稳定性。室温2年。必须在pH调完后再加入叠氮化钠。酸化的叠氮化钠会释放出有毒气体。
2.醋酸钠缓冲液(1.2M, pH3.8) 
     69.6ml冰醋酸(1.05g/mL)加入800mL蒸馏水, 用4M NaOH调节pH到3.8, 定容到1L。室温下保存12个月。
3.氢氧化钾溶液(2M)
加入112.2 g KOH 至900 mL 去离子水,搅拌溶解,定容一升。储存于密闭容器。室温下>2年。
4. MOPS缓冲液(50mM,pH7.0)+氯化钙(5mM) +叠氮化钠(0.02%)(仅用于example b分析样品)
    11.55g MOPS(钠盐, Sigma cat. M-9381)加入900mL蒸馏水, 用1M(10%V/V)HCl调节pH到7.0,大约需要17mL。 添加二水氯化钙(0.74g)和叠氮化钠(0.2g), 完全溶解, 然后调整到1L, 4°C下保存6个月。
5. 醋酸钠缓冲液(200mM,pH4.5)+叠氮化钠(0.02%)(仅用于example b分析样品)
冰醋酸(11.8mL,1.05g/mL)加入900mL蒸馏水, 用1M(4g/100mL)NaOH调节pH到4.5,大约需要60mL。加入叠氮化钠(0.2g),完全溶解,然后调整到1L, 4°C下保存6个月。
注意:可通过添加叠氮化钠(0.2g/L)增加此缓冲液的稳定性。室温2年。必须在pH调完后再加入叠氮化钠。酸化的叠氮化钠会释放出有毒气体。
设备:
              1.玻璃试管(圆底;16x120mm或18x150mm)
              2.离心机(3,000rpm)
              3.微量移液器(100uL).
              4.连续分配器
              5.分析天平.
              6.分光光度计510nm.
              7.漩涡混合器
              8.定时钟
              9.沸水浴锅和试管夹
注意事项:
1.GOPOD试剂的孵育时间没有严格规定,但是至少要20分钟,并在60分钟内测定吸光度.
2.每次试验必须设定试剂空白对照和葡萄糖对照(100μg, 四倍)。
    a)试剂空白对照: 0.1mL蒸馏水+3.0mLGOPOD溶液
    b)葡萄糖对照包括:0.1mL葡萄糖标准溶液(100μg/0.1mL)+3.0mLGOPOD溶液。因子F(页码13和14)通过D-葡萄糖在标准分析中读得的吸光度进行计算(例如100/1.038=96.386)。
3.每次试验必须设定标准面粉或淀粉样品
4.每一新批此的GOPOD溶液,必须验证其与100μg葡萄糖标准反应产生颜色所需要的最长时间, 通常为15分钟左右。
样品空白:
    样品空白按照标准试验程序(example A)进行,将第4步修正为添加3mL蒸馏水,第5步中也用蒸馏水替代其中的淀粉葡糖苷酶.也可以用样品前处理中所用的酒精作为样品空白( example E)。
样品准备示例
A.不含抗性淀粉,D-葡萄糖和麦芽糊精的谷物和食物(建议的程序,pH5.0孵育)。
1.研磨谷物, 过0.5mm筛(35目)。
2.将研磨后样品(准确称量~100mg)加入到试管中(16x120mm),确保全部样品位于试管底部。
3.加入0.2mL乙醇溶液(80%v/v)湿润样品帮助分散, 用漩涡混合器混合。
4.立即加入3mL耐热α-淀粉酶(100mM醋酸钠稀释), 在沸水浴中孵育6分钟(在孵育2分钟,4分钟,6分钟的时强烈振荡试管).
    注意:在这一步中强力震荡是关键,目的是确保浆状样品能完全的混匀(去除块状)。同样,每间隔2分钟振荡也是为了防止由于酒精蒸发导致某些样品被喷出试管。如果使用聚丙烯管,增加孵育时间至12分钟,在 4, 8和12强烈震荡。
5.将试管放置于50°C的水浴锅中, 加入0.1mL瓶2成分(淀粉葡糖苷酶,330U在淀粉上)。充分混合,在50°C下孵育30分钟。
6.将全部的溶液转移到100mL的容量瓶中,用洗瓶冲洗试管,并也倒入容量瓶中,然后用蒸馏水调整溶液体积, 充分混匀。取部分溶液离心(3,000rpm,10分钟)。取清澈的未稀释的上清用于分析。
     注意:对于含有1-10%淀粉的样品,在第6步中用蒸馏水调整溶液至10mL,充分混匀,离心(3,000rpm,10分钟),该溶液可以直接进行第7步.对于含10-100%淀粉的样品,用蒸馏水稀释1.0mL样品液到10mL再进行第7步。
7.转移两份稀释的样品溶液(0.1mL)到园底试管中(16x100mm)。
8.加入3.0mLGOPOD溶液到每一个试管中(包括葡萄糖对照和试剂空白对照), 然后在50°C下孵育20分钟
9.葡萄糖对照包括0.1mL葡萄糖标准溶液(1mg/mL)+3.0mLGOPOD溶液。              试剂空白对照: 0.1mL蒸馏水+3.0mLGOPOD溶液
10.相对于试剂空白在510nm下测定每一个样品和葡萄糖质控的吸光度。
B.不含抗性淀粉,D-葡萄糖和麦芽糊精的谷物和食物(AOAC 996.11)。
1.研磨谷物, 过0.5mm筛(35目)。
2.将研磨后样品(准确称量~100mg)加入到试管中(16x120mm),确保全部样品位于试管底部。
3.加入0.2mL乙醇溶液(80%v/v),用漩涡混合器混合。
4.立即加入3mL耐热α-淀粉酶(50mM MOPS稀释), 在沸水浴中孵育6分钟(在孵育2分钟,4分钟,6分钟的时强烈振荡试管).
    注意:在这一步中强力震荡是关键,目的是确保浆状样品能完全的混匀(去除块状)。同样,每间隔2分钟振荡也是为了防止由于酒精蒸发导致某些样品被喷出试管。如果使用聚丙烯管,增加孵育时间至12分钟,在 4, 8和12强烈震荡。
5.将试管放置于50°C的水浴锅中, 加入醋酸钠缓冲液(4ml,200mM,pH4.5),加入0.1mL瓶2成分(淀粉葡糖苷酶, 20U)。充分混合,在50°C下孵育30分钟。
6. 按照example A 步骤6继续实验。
C.含抗性淀粉,不含D-葡萄糖和麦芽糊精的谷物和食物(建议KOH溶解)
1.研磨谷物, 过0.5mm筛(35目)。
2.将研磨后样品(准确称量~100mg)加入到试管中(16x120mm),确保全部样品位于试管底部。
3.加入0.2mL乙醇溶液(80%v/v),用漩涡混合器混合。
4.放入搅拌架子,加入2ml 2M KOH至每个试管中,冰水混合浴中搅拌20分钟左右,重悬粉末和溶解抗性淀粉。
注意:
1.不要使用涡旋仪混匀,会使淀粉乳化。
2.确保加入KOH时,试管处于剧烈震荡状态。这是为了避免淀粉形成团块难以溶解。
5.当试管在磁力搅拌器上搅拌时,加入8ml 1.2M醋酸钠缓冲液(pH3.8)至每个试管。立即加入0.1ml耐热α-淀粉酶(瓶1)和0.1mL淀粉葡糖苷酶(瓶2),充分混合,在50°C下孵育
6. 孵育30分钟,间断混匀。
7. 样品淀粉含量>10%:将全部的溶液转移到100mL的容量瓶中,用洗瓶冲洗试管,并也倒入容量瓶中,然后用蒸馏水调整溶液体积至100ml, 充分混匀。取部分溶液离心(1800g,10分钟)。
8. 样品淀粉含量<10%:直接离心(1800g,10分钟)。总体积约10.4ml(此体积可能有一定波动,特别是湿样品用于分析时,估计体积用于计算)。
9. 按照example A 步骤7继续实验。
D.含抗性淀粉,不含D-葡萄糖和麦芽糊精的谷物和食物(AOAC 996.11 DMSO溶解)
1.研磨谷物, 过0.5mm筛(35目)。
2.将研磨后样品(准确称量~100mg)加入到试管中(16x120mm),确保全部样品位于试管底部。
3.加入0.2mL乙醇溶液(80%v/v),用漩涡混合器混合。
4.立即加入2ml DMSO,涡旋混匀。沸水浴5分钟。
5.按照example A 步骤4继续实验。
E.含D-葡萄糖和麦芽糊精的谷物和食物
1.研磨谷物, 过0.5mm筛(35目)。
2.将研磨后样品(准确称量~100mg)加入到试管中(16x120mm),确保全部样品位于试管底部。
3.加入5mL乙醇溶液(80%v/v),80-85°C孵育5分钟。涡旋混匀,再加入5ml乙醇溶液(80%v/v)。
4.离心1800g(3000rpm)10分钟。去除上清。
5.10mL乙醇溶液(80%v/v)重悬沉淀。离心去除上清。
6. 按照example A 步骤4继续实验。
若样品含抗性淀粉,按照example C步骤4继续实验。
计算:
ΔA=相对于试剂空白所读取的吸光度
    FV=总体积(例如100ml或10ml)
0.1 =样品分析体积
1/1000=转化从ug至mg
100/w=淀粉作为干粉重量的比例。
W=干粉重量
162/180=D葡萄糖转化为脱氢葡萄糖
淀粉%(占干物质比重):=淀粉%X100/100-水分含量(%)

 

英文说明:

The Total Starch (AA/AMG) test kit is used for the measurement and analysis of total starch in cereal flours and food products. This kit now contains an improved α-amylase that allows the amylase incubations to be performed at pH 5.0 (as well as pH 7.0).

Colourimetric method for the determination of Total Starch in
cereal products, feeds, foodstuffs and other materials

Principle:
(α-amylase, 100°C ± DMSO)
(1) Starch granules + H2O → maltodextrins

(amyloglucosidase)
(2) Maltodextrins + H2O → D-glucose

(glucose oxidase)
(3) D-Glucose + H2O + O2 → D-gluconate + H2O2

(peroxidase)
(4) 2H2O2 + p-hydroxybenzoic acid + 4-aminoantipyrine →
quinoneimine + 4H2O

Kit size: 100 assays
Method: Spectrophotometric at 510 nm
Total assay time: ~ 90 min
Detection limit: 1-100% of sample weight
Application examples:
Cereal flours, food products and other materials
Method recognition:
AOAC (Method 996.11), AACC (Method 76-13.01), ICC (Standard Method
No. 168), and RACI (Standard Method)

Advantages

  • Very competitive price (cost per test)
  • All reagents stable for > 12 months after preparation
  • Simple format
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Standard included

Megazyme K-SUFRG 蔗糖/D-果糖/D-葡萄糖检测试剂盒

Megazyme K-SUFRG 蔗糖/D-果糖/D-葡萄糖检测试剂盒

Megazyme代理,部分现货,期货产品2-3周

欢迎访问Megazyme官网或者咨询我们获取更多产品信息。

产品名称:蔗糖/D-果糖/D-葡萄糖检测试剂盒

英文名称:Sucrose,D-fructose and D-glucose sucrose assay kit

货号:K-SUFRG

型号规格:150 (50 of each)

优点:价格低廉(每次检测成本);

所有试剂配制后的稳定性〉12个月;

反应快;葡萄糖氧化酶/过氧化酶/己糖激酶/6-磷酸葡萄糖脱氢酶;

包含标准品

检测原理:

检测方法:紫外分光光度法

检测波长:340nm;

反应时间:30min;

检测限:1.38mg/L;

适用样品:啤酒、果汁、软饮料、牛奶、果酱、蜂蜜、面包、焙烤产品、乳制品、糖果、甜点、糖食、冰淇淋、水果和蔬菜(如:马铃薯)、肉制品(如香肠)、调味品、饲料、烟、化妆品、纸及其他原料(如生物培养、样品等);

方法认证:EN。NEN。NF。DIN,GOST,IFU ,AIJN,MEI,IOCCC以及德国、奥地利认证

商品说明:

The Sucrose/Fructose/D-Glucose test kit is suitable for the measurement and analysis of sucrose, D-glucose and D-fructose in plant and food products.

Extended cofactors stability. Dissolved cofactors stable for > 1 year at 4oC.

UV-method for the determination of Sucrose, D-Fructose and
D-Glucose in foodstuffs, beverages and other materials

Principle:
(β-fructosidase)
(1) Sucrose + H2O → D-glucose + D-fructose

(hexokinase)
(2) D-Glucose + ATP → G-6-P + ADP

(hexokinase)
(3) D-Fructose + ATP → F-6-P + ADP

(glucose-6-phosphate dehydrogenase)
(4) G-6-P + NADP+ → gluconate-6-phosphate + NADPH + H+

(phosphoglucose isomerase)
(5) F-6-P → G-6-P

Kit size: 100 assays of each
Method: Spectrophotometric at 340 nm
Reaction time: ~ 30 min
Detection limit: 1.38 mg/L
Application examples:
Beer, fruit juices, soft drinks, milk, jam, honey, dietetic foods, bread,
bakery products, dairy products, candies, desserts, confectionery, sweets,
ice-cream, fruit and vegetables (e.g. potato), meat products (e.g. sausage),
condiments (e.g. ketchup and mustard), feed, tobacco, cosmetics,
pharmaceuticals, paper and other materials
Method recognition:
Methods based on this principle have been accepted by NF, EN, NEN,
DIN, GOST, IFU, AIJN, MEBAK and IOCCC

Advantages

  • Very competitive price (cost per test)
  • All reagents stable for > 2 years after preparation
  • Rapid reaction
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Stabilised D-glucose / D-fructose standard solution included
  • Extended cofactors stability

Megazyme K-PANOPA 一级氨基氮[NOPA]检测试剂盒

Megazyme K-PANOPA 一级氨基氮[NOPA]检测试剂盒

名称:一级氨基氮[NOPA]检测试剂盒

英文名:Primary Amino Nitrogen(NOPA) Assay Kit

Catalogue Number: K-PANOPA

规格:100次

产地:爱尔兰

Primary Amino Nitrogen (PANOPA)

For the assay of primary amino nitrogen in grape juice/must and wine.

Content: 100 assays per kit

商品说明:

The Primary Amino Nitrogen (PANOPA) Assay Kit is suitable for the measurement and analysis of primary amino nitrogen in grape juice/must and wine.
Suitable for manual, auto-analyser and microplate formats.

UV-method for the determination of Primary Amino Nitrogen in
grape juice, must, wine and other materials

Principle:
(room temperature)
(1) Amino nitrogen + N-acetyl-L-cysteine + o-phthaldialdehyde →
isoindole derivative

Kit size: 100 assays (manual) / 1000 (microplate)
/ 1100 (autoanalyser)
Method: Spectrophotometric at 340 nm
Reaction time: ~ 15 min
Detection limit: 2.59 mg N/L
Application examples:
Grape juice, must, wine and other materials
Method recognition: Novel method

Advantages

  • Simple format (absorbances read at 340 nm)
  • Very competitive price (cost per test)
  • All reagents stable for > 2 years after preparation
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Standard included
  • Suitable for manual, microplate and auto-analyser formats

Megazyme K-MBGL Beta葡聚糖酶[麦芽和微生物]检测试剂盒

Megazyme K-MBGL Beta葡聚糖酶[麦芽和微生物]检测试剂盒

Megazyme代理,部分现货,期货产品2-3周

欢迎访问Megazyme官网或者咨询我们获取更多产品信息。

1) 英文:Beta-Glucanase (Malt & Microbial) Assay Kit;

2) 中文:Beta葡聚糖酶[麦芽和微生物]检测试剂盒;

3) 规格: 100;

4) 货号:K-MBGL

商品说明:

β-Glucanase (Malt and Microbial) Assay Kit is suitable for the measurement and analysis of malt and bacterial β-glucanase and endo-1,4-β-glucanase.

Colourimetric method for the determination of β-Glucanase
in malt, foodstuffs and fermentation products

Principle:
(β-glucanase)
(1) Azo-Barley β-glucan (polymer) → Azo-barley β-glucan
(fragments)

(2) Add alcohol; centrifuge to remove polymeric Azo-barley
β-glucan

(3) Measure the absorbance of the supernatant solution

Kit size: 100 assays
Method: Spectrophotometric at 590 nm
Reaction time: ~ 30 min
Detection limit: 100 U/kg of malt
Application examples:
Malt extracts, wort, beer and other materials
Method recognition:
RACI (Standard Method)

Advantages

  • Very cost effective
  • All reagents stable for > 2 years during use
  • Only kit available
  • Very specific
  • Simple format
  • Standard included

Megazyme K-MANGL D-甘露糖/D-果糖/D-葡萄糖检测试剂盒

Megazyme K-MANGL D-甘露糖/D-果糖/D-葡萄糖检测试剂盒

Megazyme代理,部分现货,期货产品2-3周

欢迎访问Megazyme官网或者咨询我们获取更多产品信息。

产品名称:D-甘露糖/D-果糖/D-葡萄糖检测试剂盒

英文名称:D-mannose/D-fructose/D-glucose assay kit

货号: K-MANGL

型号规格:55次

优点:成本低(每次检测成本);所有试剂配制后的稳定性〉2年;只有酶试剂盒可用;方法简单;反应快;包含标准品

检测原理:

检测方法:紫外分光光度法

检测波长:340nm;

反应时间:25min;

检测限:0.66mg/L;

适用样品:食品、酵母细胞制剂、酶水解产物和其他原料(如:生物培养、样品等);

方法认证:新方法

商品说明:

The D-Mannose/D-Fructose/D-Glucose test kit is suitable for the specific measurement and analysis of D-mannose, D-fructose and D-glucose in plant products and in acid hydrolysates of polysaccharides.

UV-method for the determination of D-Mannose, D-Fructose
and D-Glucosein foodstuffs, yeast cell preparations and
other materials

Principle:
(hexokinase)
(1) D-Mannose / D-fructose / D-glucose + ATP →
M-6-P / F-6-P / G-6-P + ADP

(glucose-6-phosphate dehydrogenase)
(2) G-6-P + NADP+ → gluconate-6-phosphate + NADPH + H+

(phosphomannose isomerase) (phosphoglucose isomerase)
(3) M-6-P ↔ F-6-P ↔ G-6-P

Kit size: 55 assays
Method: Spectrophotometric at 340 nm
Reaction time: ~ 30 min
Detection limit: 0.7 mg/L
Application examples:
Foodstuffs, yeast cell preparations, enzymatic hydrolysates and other
materials (e.g. biological cultures, samples, etc.)
Method recognition: Novel method

Advantages

  • Very competitive price (cost per test)
  • All reagents stable for > 2 years after preparation
  • Only enzymatic kit available
  • Simple format
  • Rapid reaction
  • Mega-Calc™ software tool is available from our website for hassle-free raw data processing
  • Standard included