Wako结肠癌造模诱导结肠癌造模诱导剂

Wako结肠癌造模诱导结肠癌造模诱导剂-偶氮甲烷(Azoxymethane,AOM)

结肠癌造模诱导剂(Wako/Sigma)

偶氮甲烷(Azoxymethane,AOM)

基本描述:

偶氮甲烷(氧化偶氮甲烷),英文Azoxymethane,缩写AOM,可有效诱导大小鼠结肠癌,广泛用作一种基质引起实验动物发生结肠肿瘤,从而研究癌症预防物和癌症形成机制。另外,越来越多结肠癌病例的发生,使得癌症预防物的研究也越来越流行。按照每周一次皮下注射AOM(15mg/kg体重)进入大鼠体内,连续3周给药。数周后能观察到癌前期病变。

作用机制:偶氮甲烷(AOM)能诱导DNA产生O6-甲基鸟嘌加合物,导致G→A转化。

主要应用:偶氮甲烷(AOM)常联合DSS(Mw:36000-50000 Da)注射动物,建立结肠癌模型,用来研究癌症发展机制和化学预防。

基本特征:

1)  CAS NO. 25843-45-2

2)  线性分子式:CH3N=N(→O)CH3【C2H6N2O】

3)  分子量:74.08

4)  纯度:≥98%

5)  结构式:

结肠癌(Colon cancer)模型建立案例:

1、  文献来源:Wirtz S, et al. Chemically induced mouse models of intestinal inflammation. Nat Protoc. 2007; 2(3):541-6.

1.1    DSS溶液制备(2% DSS溶液):溶解10gDSS于500ml无菌的饮用水中,使用前溶液保存在4℃,最好现配现用。

1.2    AOM溶液制备:用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液,分装后放到-20℃保存,避免反复冻融。使用之前,融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。

1.3    小鼠结肠炎相关的依赖性结直肠癌造模方法

1)  第1天称重和标记小鼠;

2)  按10 mg/kg体重的剂量腹腔注射AOM溶液;

3)  加DSS溶液灌满小鼠笼内的饮水槽,以5ml DSS溶液/小鼠/天加量,对照小鼠加等体积不含DSS的饮用水;

4)  第3天清空笼子内剩余的DSS饮用水,过两天重新装满DSS溶液;

5)  第5天清空笼子内剩余的DSS饮用水,重新装满DSS溶液;

6)  第8天清空笼子内剩余的DSS溶液,换上不含DSS的无菌水持续14天;

7)  第22-26天重复第3)-5)步;

8)  第29天清空笼子内剩余的DSS溶液,换上不含DSS的无菌水持续14天;

9)  第43-47天重复第3)-5)步;

10)第50天清空笼子内剩余的DSS溶液,换上不含DSS的无菌水;

2、文献来源:Neufert C, et al. An inducible mouse model of colon carcinogenesis for the analysis of sporadic and inflammation-driven tumor progression. Nat Protoc. 2007; 2(8):1998-2004.

2.1 DSS溶液制备(2.5% DSS溶液):称取2.5g DSS溶于100ml无菌水,本溶液置于4℃可稳定保存1周。最好现配现用。

2.2 AOM溶液制备:用无菌水溶解AOM配制10 mg/ml的储存液,分装后放到-20℃保存,避免反复冻融。AOM在水或生理盐水中的稳定性高于PBS缓冲液,且在玻璃管内稳定性好于塑料管。使用之前,融化分装母液并用无菌生理盐水1:10倍稀释。

2.3 小鼠结肠癌造模方法

1)第1天称重,等数分组并标记小鼠;

2)按照10mg/kg体重的浓度计算所需的AOM量,取适量的AOM储存液(10mg/ml)用无菌生理盐水1:10倍稀释。

3)腹腔注射AOM工作液(剂量10mg/kg体重,则10g体重小鼠注射100ul工作液)到实验组小鼠,同时注射等体积的无菌生理盐水到对照组小鼠。

4)自此步之后,按照两种方法继续实验。若建立自发性肿瘤进展模型,见方案A;若建立慢性炎症驱动的肿瘤进展模型,见方案B。

方案A,自发性肿瘤进展模型

A1,第8天重复步骤1)-3);

A2,第15天重复步骤1)-3);

A3,第22天重复步骤1)-3);

A4,第29天重复步骤1)-3);

A5,第36天重复步骤1)-3);【到这步每只小鼠都腹腔注射给药6次】

A6,第一次注射后的3个月评估癌前病变,此时不需处死动物。

A7,第一次注射后的6个月评估肿瘤发展。

方案B,慢性炎症驱动的肿瘤进展(Chronic inflammation-driven tumor progression)

B1,制备2.5%(wt/v)DSS溶液。此浓度的DSS能让FVB/N小鼠和其他品系产生良好的造模效果。

B2,按3天的用量加DSS溶液灌满小鼠笼内的饮水槽,以5ml DSS溶液/小鼠/天用量,对照小鼠加等体积不含DSS的饮用水;

B3,第4天清空饮水槽内残留DSS溶液,并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。

B4,第6天清空饮水槽内残留DSS溶液,并且重新灌满另2天所需量的新鲜DSS溶液。

B5,第8天清空饮水槽内残留DSS溶液,并且重新灌满灭菌水。

B6,第22-29日重复步骤B1)-B5)。

B7,第40日评估癌前病变,此时不需处死动物。

B8,第53-60日重复步骤B1)-B5)。

B9,第80日评估肿瘤发展。

2.4 AOM诱导肿瘤图示(图1)

 

图1.内窥镜肿瘤调研。通过迷你腔镜监测AOM诱导的肿瘤形成情况。a)还能用于纵向研究;b)对于肿瘤负荷分析,每只小鼠的肿瘤大小按照预设的时间点记录并做总和。

Azoxymethane(AOM)订购信息:原装正品,欢迎来电咨询,021-50837765  18301939375

品牌 货号 名称 CAS NO. 规格
Sigma A5486-25MG Azoxymethane 偶氮甲烷 25843-45-2 25mg
Sigma A5486-100MG Azoxymethane 偶氮甲烷 25843-45-2 100mg
Wako 011-20171 Azoxymethane 偶氮甲烷 25843-45-2 100mg

 

DSS(Mw:36000-50000 Da)

品牌 货号 名称 规格
MPbio 0216011010 DSS(Mw:36000-50000 Da)硫酸葡聚糖钠盐 10g
MPbio 0216011050 DSS(Mw:36000-50000 Da)硫酸葡聚糖钠盐 50g
MPbio 0216011080 DSS(Mw:36000-50000 Da)硫酸葡聚糖钠盐 100g
MPbio 0216011090 DSS(Mw:36000-50000 Da)硫酸葡聚糖钠盐 500g
动物疾病模型主要用于实验生理学、实验病理学和实验治疗学(包括新药筛选)研究。人类疾病的发展十分复杂,以人本身作为实验对象来深入探讨疾病发生机制,推动医药学的发展来之缓慢,临床积累的经验不仅在时间和空间上都存在局限性,而且许多实验在道义上和方法上也受到限制。而借助于动物模型的间接研究,可以有意识地改变那些在自然条件下不可能或不易排除的因素,以便更准确地观察模型的实验结果并与人类疾病进行比较研究,有助于更方便,更有效地认识人类疾病的发生发展规律,研究防治措施。
动物疾病模型建模试剂
货号 品牌 产品名称 包装 应用
肠炎模型动物诱导剂
184505 硫酸葡聚糖 Dextran sulfate,Na(MW:36,000~50,000) 100g 肠炎
糖尿病模型动物诱导剂
177295 链脲佐菌素 Streptozocin; STZ 500mg 糖尿病
肠癌模型动物诱导剂
011-20171 WAKO 氧化偶氮甲烷 AZOXYMETHANE 100mg 肠癌
0520606401 MP 二甲基肼二盐酸 N,N’-DIMETHYLHYDRAZINE di HCl (SYM) 1g 肠癌
D161802-10g Sigma 1,2-二甲基肼二盐酸盐 N,N’-Dimethylhydrazine dihydrochloride 10g 肠癌
138-14901 WAKO 1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍 1-METHYL-3-NITRO-1-NITROSUGUANIDINE 5g 肠癌
过敏性皮炎诱发试剂
303-34131 Biostir AD 15g 过敏性皮炎
胃肠炎症动物模型
205-17381 TFAP 10mg 胃肠炎症
动物模型饲料
D12450B Research Diets DIO (LFD) 10 kcal% fat 12.5kg 肥胖、糖尿病
D12451 Research Diets DIO (HFD) 45 kcal% fat 12.5kg 肥胖、糖尿病
D12492 Research Diets DIO (VHFD) 60 kcal% fat 12.5kg 肥胖、糖尿病
D10001 Research Diets AIN-76A 12.5kg 肥胖、糖尿病、 骨质疏松症、高血压、动脉粥样硬化、代谢综合症
D10012G Research Diets AIN-93G 12.5kg 肥胖、糖尿病、 骨质疏松症、高血压、动脉粥样硬化、代谢综合症
D10012M Research Diets AIN-93M 12.5kg 肥胖、糖尿病、骨质疏松症、高血压、动脉粥样硬化、代谢综合症
D12266B Research Diets Condensed Milk Diet Purified match to C11024 12.5kg 肥胖、糖尿病、高血压
D12489B Research Diets Low-fat control to D12266B 12.5kg 肥胖、糖尿病、高血压
D12079B Research Diets RD Western Diet 12.5kg 肥胖、糖尿病、骨质疏松症、高血压、动脉粥样硬化、代谢综合症
D12330 Research Diets 58 kcal% fat w/corn starch 12.5kg 肥胖、糖尿病
D12328 Research Diets Control: 11 kcal% fat w/corn starch 12.5kg 肥胖、糖尿病
D12331 Research Diets 58 kcal% fat w/sucrose 12.5kg 肥胖、糖尿病
D12329 Research Diets Control: 11 kcal% fat w/sucrose 12.5kg 肥胖、糖尿病