EDTA抗原修复液(50×) pH8.0,常用生化试剂

EDTA抗原修复液(50×) pH8.0品牌:JinPan | 货号:JP-8329-100ml

EDTA Antigen Retrieval Solution,50×,pH8.0

【保存条件】 

4ºC 保存 

【概述】 

EDTA 抗原修复液是一种常用的抗原修复液,可以用于石蜡切片、冰冻切片等样品使用多聚甲醛、甲醛或 其它醛类试剂固定后的抗原修复。 

细胞或组织用多聚甲醛、甲醛或其它醛类试剂固定后,会导致蛋白之间的交联(cross-link),从而遮蔽样品的 抗原位点,导致免疫染色时染色信号减弱,甚至出现一些假阳性染色结果。 

本抗原修复液采用了广泛使用的 EDTA,可以有效去除醛类固定试剂导致的蛋白之间的交联,充分暴露石 蜡切片等样品中的抗原表位,从而大大改善免疫染色效果。 

【操作方法】 

1. 对于石蜡切片: 

a. 脱蜡:二甲苯 3 次,每次 3-5min→ 无水乙醇 2 次,每次 3-5min→ 95%乙醇 1 次,3-5min→ 90%乙醇 1 次,3-5min→ 75%乙醇 1 次,3-5min→ 蒸馏水洗 2 次,每次 3-5min。 

b. 抗原修复: 

① 用去离子水稀释 EDTA 抗原修复液(50×,pH8.0)至 1×,例如 1ml 本抗原修复液(50×)加入 49ml 去离子水,混合均匀,即得 50ml 1×抗原修复液;

② 将切片浸泡在抗原修复液(1×)中;95-100℃加热约 15 min (加热时间可以控制在 10-20 min 内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需 预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉 加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。 随后大约在 20-30 min 内冷却至室温。 ③ 用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 

2. 对于冰冻切片: 

① 用去离子水稀释 EDTA 抗原修复液(50×,pH8.0)至 1×,例如 1ml 本抗原修复液(50×)加入 49ml 去离子水,混合均匀,即得 50ml 1×抗原修复液; 

② 用免疫染色洗涤液洗涤切片 5min; 

③ 将切片浸泡在抗原修复液 (1×)中,95-100℃加热约 15 min (加热时间可以控制在 10-20 min 内,最佳的加热时间需根据不同的样品和目的蛋白自行摸索)。抗原修复液(1×)使用前需 预热到 95-100℃。加热可以使用普通的水浴锅,也可以使用微波炉加热。如果使用微波炉 加热,需注意避免暴沸和过多的水分蒸发。随后大约在 20-30 min 内冷却至室温。 

④ 用免疫染色洗涤液洗涤 1-2 次,每次 3-5 min。随后即可进行封闭等后续的免疫染色步骤。 

3. 对于其它样品的抗原修复,可以参考石蜡切片或冰冻切片的步骤进行。 

【注意事项】 

1. 本品含 Tween-20,可提高细胞通透性,95-100℃加热时出现气泡属于正常现象。 

2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。 

3. 用后请及时拧紧瓶盖,以防挥发。

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