Bradford蛋白浓度测定试剂盒-2000T品牌：JinPan | 货号：EK-5002-2000T
Bradford Protein Assay Kit
【包装规格】
【保存条件】
BSA 存于-20℃，其它试剂 4℃保存稳定 12 个月。
【概述】
考马斯亮兰 G-250 染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（Imax），由 465nm 变为 595nm，在一定的浓度范围内，测定的吸光度值 A595 与蛋白质浓度成正比。Bradford 法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，样品中巯基乙醇的浓度可高达 1M，二硫苏糖醇的浓度可高达 5mM，但受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS 的浓度低于 0.1%，Triton X-100 低于 0.1%，Tween 20, 60, 80 低于 0.06%。
【使用方法】
1. 蛋白标准液的准备
a. 蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，如果蛋白样品所在溶液不含有干扰本试剂盒检测的物质，也可以用 0.9%NaCl、PBS 或水稀释标准品。蛋白标准液(5mg/ml BSA)如果冻存，请完全融化并混匀后使用。
b. 按照下表配制 0、0.125、0.25、0.5、0.75、1、1.5mg/ml 蛋白标准。每次稀释时注意充分混匀。如果有必要可以增加设置 0.0625mg/ml 的蛋白标准。
2. 蛋白浓度测定
a. 取 5µl 不同浓度蛋白标准加到 96 孔板的蛋白标准孔中。
b. 取 5µl 样品到 96 孔板的样品孔中。如果样品不足 5µl，需加标准品稀释液补足到 5µl。请注意记录样品体积。
c. 各孔加入 250µl G250 染色液。
d. 用酶标仪测定 A595，或 560-610nm 之间的其它波长的吸光度。可以立即测定吸光度，也可以在 2 小时内测定，2 小时内检测数据无显著变化。
e. 根据标准曲线和使用的样品体积计算出样品中的蛋白浓度。
【注意事项】
1. 本品 BSA 因每次使用量较小，推荐分装使用。
2. 不同 96 板的吸收值会有不同，得到 OD 有区别为正常现象（保证数据呈线性关系）
3. 请使用 96 孔底部透明板（如普通细胞培养板）检测，最佳波长为 595nm。
4. 将 G250 染色液回复至室温后使用，有利于提高检测灵敏度。
5. 为了您的安全与健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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