普通琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒品牌：genefist | 货号：GF209-03 
储存条件
该试剂盒置于室温（15-25℃）干燥条件下，可保存18个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10 min，以溶解沉淀。
产品简介
本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统，从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段，同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。可回收100 bp-30kb大小的片段，回收率可达80%以上。每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为10 μg。使用本试剂盒回收的 DNA 可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实
验。如果回收前 DNA 量为 1-5ug，建议选用 DF208 超薄琼脂糖凝胶回收 kit，推荐洗脱液体积 20-50ul。
产品特点
快速：整个操作过程快速方便，几十分钟即可完成回收工作。
多样：可以回收单链、双链DNA片段以及环状质粒DNA。
高效：独特的离心柱和精心配制的缓冲液，可大量回收到高纯度的目的DNA。
注意事项
1.电泳时应使用新的电泳缓冲液，以免影响电泳和回收效果。
2.如下一步实验要求较高，则应尽量使用 TAE 电泳缓冲液。
3.切胶时，紫外照射时间应尽量短，以免对 DNA 造成损伤。
4.回收率与初始 DNA 量和洗脱体积有关，初始量越少、洗脱体积越少，回收率越低。
5.对于<100 bp 和>10 kb 的 DNA 片段可以适当的增加吸附和洗脱的时间。
操作步骤
使用前请先在漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1.完成电泳后，将单一的目的 DNA 条带从琼脂糖凝胶中切下（尽量切除多余部分）放入干净的离心管中，称取重量（如果凝胶重为 0.1 g，其体积可视为 100 μl）。
2.向胶块中加入 2 倍体积（如果琼脂糖凝胶浓度＞2%，则加入 3 倍体积）的溶液 PN，60℃水浴孵育 5-15 min或更久，其间不断温和地上下翻转离心管，直至胶块充分溶解（若胶块的体积过大，可事先将胶块切成碎
块）。
注意：胶块完全溶解后将胶溶液温度降至室温再上柱，因为吸附柱在室温时结合 DNA 的能力较强。
3.将吸附柱 CB2 放入收集管中，移取上一步溶胶液至吸附柱，室温放置 2 min，以 12,000 rpm(~13,400×g )离心 1 分钟，丢弃收集管中的滤液，将吸附柱 CB2 放回收集管中。
注意：若样本体积超过 700ul，可分次加入并重复此步骤。
4.可选步骤：向吸附柱 CB2 加入 400ul 的溶液 PN，以 12,000 rpm(~13,400×g )离心 1 分钟，丢弃收集管中的滤液，将吸附柱 CB2 放回收集管中（此步骤可去除残余的琼脂糖凝胶，以避免纯化的 DNA 进行酶切反应时出现抑制现象）。
5.向吸附柱 CB2 加入 700ul 的漂洗液，静置 1 分钟以平衡管柱膜，于 12,000 rpm(~13,400×g )离心 1 分钟，丢弃滤液，将吸附柱 CB2 放回收集管中。
6.重复操作步骤 5。
7.将吸附柱 CB2 放回收集管中，12,000 rpm(~13,400×g )离心 2 分钟，将吸附柱开盖置于室温放置数分钟，以去除、晾干残余的漂洗液。
注意：漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR 等）实验。
8.将吸附柱 CB2 置于一个干净离心管中，向吸附膜中间位置悬空滴加 30-100ul 洗脱缓冲液 TB，室温放置 2min。12,000 rpm (~13,400×g )离心 2 min 收集 DNA 溶液。
注意：洗脱体积不应小于 30 μl，体积过少影响回收效率。洗脱液的 pH 值对于洗脱效率有较大影响，若后续做测序，需使用 ddH2O 做洗脱液，并保证其 pH 值在 7.0-8.5 范围内，pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率；且 DNA 产物应保存在-20°C，以防 DNA 降解。为了提高 DNA 的回收量，可将离心得到的溶液重新加回离心吸附柱中，室温放置 2 min，12,000 rpm(~13,400×g)离心 2 min，将 DNA 溶液收集到离心管。
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