目录号

NA0531-1ML

规格

1ml

运输温度

冰袋运输

其他名称

Blasticidin   S Hydrochloride 灭瘟素S盐酸盐；稻瘟散；

保存温度

-20℃保存

CAS号

3513-03-9

有效期

2年

应用

稳定转染细胞筛选抗生素

产品简介:

Blasticidin S (10 mg/ml) 杀稻瘟菌素S（灭瘟素）（10   mg/ml）

产品标签

Blasticidin 杀稻瘟菌素；10mg/ml；bls 乙酰转移酶基因；bsr或BSD   脱氨酶基因；遗传霉素G418；Hygromycin     B 潮霉素B；CAS：3513-03-9

产品描述

Blasticidin S（杀稻瘟菌素），也称为灭瘟素S盐酸盐，稻瘟散，从灰色链霉菌Streptomyces   griseochromogenes分离到的一种核苷肽类抗生素。主要通过干扰核糖体中肽键的形成来特异性抑制原核和真核细胞的蛋白质合成。杀稻瘟菌素S用于筛选携带bsr或BSD基因的转染细胞。杀稻瘟菌素S具有快速而强效的作用模式，一个星期内完成阳性克隆的筛选，且很低的抗生素浓度便能导致细胞迅速死亡。

本品为溶于HEPES buffer，pH 7.5的无菌溶液，浓度为10mg/ml。用于细菌筛选的常用浓度为25-100μg/ml，用于哺乳动物细胞筛选的常用浓度为1-50μg/ml，初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。

产品特性

1）同义名：Blasticidin   S   Hydrochloride灭瘟素S盐酸盐；稻瘟散；

2）CAS NO.：3513-03-9

3）分子式：C17H26N8O5·HCl

4）分子量：458.9

5）纯度：>95%（HPLC）

6）化学结构式：

保存与运输方法

保存：-20℃保存，2年有效，避免反复冻融。

运输：冰袋运输。

使用浓度

1）大肠杆菌（E. coli）（常用浓度：25-100µg/ml）

E. Coli对Blasticidin   S敏感性很弱，但含Blasticidin S抗性的转化子可在低盐LB固体培养基（pH 8.0），100µg/ml Blasticidin   S的条件下进行筛选。高pH可增强抗生素筛选活性。

2）哺乳动物细胞（常用浓度：1-50µg/ml）

哺乳动物细胞系BlasticidinS的常用工作浓度范围1-50 μg/ml。初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。

一些哺乳动物细胞的建议工作浓度：

操作步骤

Blasticidin S常用浓度范围1-50 μg/ml，以10 μg/ml为多，初次实验建议通过灭杀曲线来确定最佳使用浓度。携带bsr或BSD基因的质粒转染到细胞后，用含有Blasticidin S的正常生长培养基来筛选稳转克隆。

1）转染48h后，用含适宜浓度Blasticidin   S的新鲜培养基将细胞传代；【注】：细胞处于活跃分裂期时抗生素工作最好。细胞密度太高，抗生素效率降低。分盘时覆盖率最好不超过25%。

2）每3-4天去除旧培养基，加入含相同浓度Blasticidin S的新鲜培养基；

3）7天后评估细胞集落形成。根据宿主细胞种类和转染/筛选效率，集落形成可能需要再增加一周或更久。

4）转移5-10个抗性克隆到35mm细胞培养盘，加入选择培养基维持培养7天。随后进行细胞毒性检测。

注意事项

1）Blasticidin S为有毒化合物，操作时需注意防护，切勿与身体或皮肤直接接触。

2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。