EZ poly™mRNA转染试剂
产品编号 |
产品名称 |
包装规格 |
NBS2052-0.5ml |
EZ poly™mRNA转染试剂 |
0.5ml |
NBS2052-1ml |
EZ poly™mRNA转染试剂 |
1ml |
NBS2052-5ml |
EZ poly™mRNA转染试剂 |
5x1ml |
产品简介:
EZ poly™mRNA转染试剂是一款高性能的mRNA专用转染试剂,可用于mRNA在多种贴壁细胞中的传送。可直接将mRNA传递到细胞质中进行表达,避免了转录调控作用及进入细胞核的限制。可被应用在短期蛋白表达的相关研究工作中。
应用范围:
EZ poly™mRNA转染试剂可适用于众多贴壁或悬浮细胞株的mRNA转染。在各种常规、难转、原代细胞及干细胞中均可得到较高的转染效率,且性能稳定。与其它转染试剂相比,具有不受血清影响、毒性低、稳定性好、转染简单易行、重复性好等优点。
保存条件:
2-8℃保存一年
运输:
常温运输
mRNA的转染:
以24孔板为例,请参考表1的转染规模调整,步骤如下:
1 |
细胞接种: 每孔接种0 . 5 ~ 1 . 0 × 105 个细胞,细胞培养 12~24小时,使转染时细胞密度达到60~70%融合度 |
2 |
mRNA稀释: 将0.5µg的mRNA加入到Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL |
3 |
转染试剂稀释: 取1μL的EZ poly™mRNA转染试剂加入到9μL 的Opti-MEM培养基中,稀释后的终体积为10µL |
4 |
复合物制备:将上述mRNA稀释液和转染试剂稀释液混合,轻轻吹打均匀后,室温静置10分钟 |
5 |
将上述20µL复合物加入到24孔板中,轻轻吹打混匀,继续培养18~48小时后检测转染效率,无需更换培养基 |
mRNA的转染优化:
可通过改变细胞密度、mRNA浓度以及EZ poly™mRNA转染试剂浓度对转染进行优化。保证细胞融合度在60%以上,EZ poly™mRNA转染试剂(µL): mRNA (µg)可以在1:1和5:1之间调整。转染步骤与DNA相同,请参考表1的转染规模进行调整,所有数量和体积均是按孔计算。转染高密度细胞可获得高转染效率、高表达水平和低细胞毒性。
表1. 不同培养板所需转染试剂和mRNA的用量
培养板 |
单孔面积 |
接种 培养基 |
Opti-MEM培 养基释后终体积 |
mRNA转染 |
|
试剂用量 |
mRNA |
||||
96孔板 |
0.3cm2 |
200µL |
10µL |
0.4µL |
0.2µg |
24孔板 |
2.0cm2 |
500µL |
20µL |
1.0µL |
0.5µg |
12孔板 |
4.0cm2 |
1mL |
40µL |
2.0µL |
1.0µg |
6孔板 |
10.0cm2 |
2mL |
100µL |
4.0µL |
2.0µg |
60mm |
20.0cm2 |
5mL |
0.2mL |
8.0µL |
4.0µg |
100mm |
60.0cm2 |
15mL |
0.6mL |
24.0µL |
12.0µg |