5-Ethynyl-2'-deoxyuridine (EdU) 5-乙炔基-2’-脱氧尿苷
货号：NBS4211-50MG，NBS4211-250MG
品牌：JinPan
产品描述
EdU，英文全称5-Ethynyl-2'-deoxyuridine，中文全称5-乙炔基-2’-脱氧尿苷，是BrdU（5-溴-2’-脱氧尿苷）的新型替代物，可直接检测活跃的DNA合成或细胞周期的S期合成。作为胸苷的核苷类似物，可插入细胞培养物或动物体内处于活跃合成期的细胞DNA，无明显毒性。EdU的检测基于高效的点击化学反应（click reaction），是由I价铜离子催化的叠氮化物和炔烃化合物之间的反应过程。EdU含有炔烃基，可与含叠氮基团的荧光探针反应形成稳定的三唑环。
借EdU的点击反应进行DNA检测的优势是非常显而易见的。含叠氮基团荧光探针的小分子量使得EdU能在温和条件插入DNA，这相反于BrdU为基础的反应，后者需要DNA变性（通常使用HCl，加热或DNase消化）促使BrdU暴露，从而被抗BrdU抗体检测到。因此，少了变性步骤的EdU反应流程快键方便，可得到高重复性的结果，并且能轻易的与相关抗体检测靶标包括磷酸化H3、Ki67、周期蛋白cyclin B1等进行多重分析，通过流式细胞仪、荧光显微镜或高通量成像仪（HCS）来检测。
产品特性
1）CAS NO：61135-33-9
2）同义名：2'-deoxy-5-ethynyl-uridine2’-脱氧-5-乙炔基-尿苷, 2'-deoxy-5-Ethynyluridine, 5-EdU,EdU
3）分子式：C11H12N2O5
4）分子量：252.23 g/mol
5）纯度：≥98% (HPLC)
6）外观：白色至类白色固体
7）溶解性：溶于DMSO（20mg/ml），无水乙醇（~25mg/ml），PBS, pH 7.2（~10 mg/ml）
8）化学结构：
保存与运输方法
保存：-20°C干燥保存，至少2年有效。
运输：冰袋运输。
常见问题（FAQs）
1. 是否任何细胞型都能插入EdU？
答：不是。细胞必须含嘧啶核苷酸补救合成途径（pyrimidine salvage pathway），没有该途径，EdU不能被磷酸化进而不能插入复制中的DNA。
2. EdU储存液如何制备？
答：体外细胞实验，取适量EdU（Mw：252.23）溶于DMSO或生理缓冲液配制10mM母液，按单次用量分装，置于≤-20°C冻存，1年稳定。
3. 如何进行EdU标记？
起始实验建议测试一系列EdU浓度来确定最佳浓度。如果目前有进行基于BrdU的标记实验，可选择相似的浓度和标记时间作为起始EdU标记条件。更低量的EdU可能达到同BrdU的标记效果，最优浓度根据标记时间有所变化，原则上浓度越低，标记时间越长。
对于细胞培养物——哺乳动物和植物细胞用0.1–10 µM EdU孵育0.5-3h能达到相对理想的标记；
对于活体动物——根据注射方式、给药次数和检测位置有所变化。参考相应文献进行优化调整。
4. 如何进行EdU检测？
使用含叠氮基团的荧光探针如TAMRA azide，Alexa Fluor azide（包括Alexa fluor 488, 555, 594, 647）等，在含有CuSO4的染色反应液中进行荧光染色。或者直接使用我司提供的EdU增殖检测试剂盒（成像或流式检测），含有所有检测组分，使用方便。
注意事项
1）EdU是一种能插入DNA的核苷类似物，操作过程一定要注意防护，不要与皮肤直接接触。另需戴口罩避免粉尘吸入。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。