D型多聚赖氨酸 Poly-D-lysine(PDL) 5 mg/ml

货号：NBS6014-400ul

规格：400ul

品牌：JinPan

产品描述

多聚赖氨酸（poly-lysine）是一种带正电荷的氨基酸聚合物，能够结合于DNA，红细胞膜或任何带负电荷蛋白，是一种非特异性的细胞粘附因子，促进细胞吸附到固相基质上。作用机理在于其可增强细胞膜表面的负电荷离子和固相基质表面（如细胞培养皿，载玻片等）的静电相互作用。当吸附到培养表面后，多聚赖氨酸提高用于细胞结合的阳离子结合位点数。多聚赖氨酸分子量的大小与粘度相关，即分子量较低，粘度较低，使用越容易；分子量较高，粘度较高，提供的粘附位点也较多。分子量＞30,000的聚赖氨酸适用于促进细胞粘附到固体基质。 

多聚赖氨酸（poly-lysine）有两种常见亚型，D-和L-型。由于多聚赖氨酸是细胞结合的非特异性粘附因子，两种亚型都可用作包被固体基质，在细胞培养中都可促进细胞的贴壁生长。据报道多聚L-赖氨酸能够改善蛋白在ELISA培养板上的粘附性。然而细胞应用中，某些细胞能够水解多聚L-赖氨酸。此种情况必须使用多聚D-赖氨酸作为粘附因子，从而保护细胞不会因摄取过量L-赖氨酸而被破坏。 

本品为无菌的D型多聚赖氨酸（Poly-D-lysine）溶液，浓度为5mg/ml，分子量为150,000-300,000，可直接稀释后用于细胞或组织培养相关的实验。

保存与运输方法

保存：−20°C避光保存，1年稳定。

运输：冰袋运输。

注意事项

1）   在某些细胞培养应用中，一些细胞会消化多聚 L-赖氨酸并吸收，摄入过多的多聚 L-赖氨酸会产生一定的细胞毒性。因此，遇到这种情况建议选用D型多聚赖氨酸（Poly-D-lysine）。

2）   本品以氢溴酸（HBr）的形式提供，每个赖氨酸残基约含一个HBr。HBr的存在使得多聚赖氨酸能溶于中性缓冲液，通过透析除去盐离子。

3）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.      细胞培养用包被基质

使用D型多聚赖氨酸进行细胞相关包被实验，需根据不同的细胞系和应用进行包被条件的优化。一般步骤如下：
1）使用无菌组织培养级水或者PBS将5mg/ml poly-D-lysine储存液稀释到最适合自身实验体系的包被浓度。通常情况下，常用的培养皿/板包被浓度为0.1mg/ml，即将储存液稀释50倍后使用。

2）无菌条件下包被细胞培养板，使用量0.5ml-1.0ml/25cm2。轻轻摇动板底以使其覆盖整个板面

3）5min后，用枪移除培养板表面溶液，并用无菌组织培养级水或者PBS清洗板面；【注意】：有的情况需要1~2h来完成铺板，有的时候需要过夜铺板。依情况而定。

4）至少干燥2h后，方可进行细胞培养。

【注意】：如果多聚赖氨酸包被后的玻璃器皿或玻片必须除菌，可用γ-射线照射（而非高压灭菌）对其进行除菌。

【注意】：如果包被表面不平整，可用1mM醋酸镁预处理玻璃载玻片2-3h，彻底清洗干净后再开始包被。或者，玻璃载玻片用酸清洗（盐酸或硫酸），经此处理能让多聚赖氨酸溶液包被很平整。

2.      组织学研究（玻片的包被）

使用无菌组织培养级水或者PBS将5mg/ml poly-D-lysine储存液稀释到最适合自身实验体系的包被浓度，一般推荐0.1%（w/v）的poly-D-lysine溶液用于组织学玻片的制备。

将玻片用相应浓度的多聚赖氨酸溶液处理5min后，清洗玻片并将其室温过夜干燥或者在约60℃的烤箱内烘干~1h。【注意】：此工作溶液装在塑料瓶中于4℃保存，并限制使用次数在4次以内。