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BeyoECL Moon (极超敏ECL化学发光试剂盒)

发表于由

产品编号

JP010018FS
BeyoECL Moon (极超敏ECL化学发光试剂盒)
100ml

415

JP010018FM
BeyoECL Moon (极超敏ECL化学发光试剂盒)
500ml

1352

生产的Western萤光检测试剂BeyoECL Moon是一种极超敏的以luminol为基础的ECL化学发光试剂盒，发光效果显著优于BeyoECL Star，可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样品。
生产的Western萤光检测试剂目前共有三种，分别是JP010018S/JP010018M BeyoECL Plus、JP010018AS/JP010018AM BeyoECL Star和JP010018FS/JP010018FM BeyoECL Moon。常规的Western检测，优先推荐使用BeyoECL Star。对于丰度比较高的目的蛋白的检测，例如内参蛋白等的检测，推荐使用性价比更高的BeyoECL Plus。对于低丰度较难检测的目的蛋白，优先推荐使用检测灵敏度最高的BeyoECL Moon。但对于丰度适中的目的蛋白的检测，不太推荐使用BeyoECL Moon，因为使用BeyoECL Moon时由于检测灵敏度特别高，容易产生过曝的现象。
BeyoECL Moon灵敏度极高，Western blot检测效果与Thermo公司SuperSignal West Dura相当或略佳(参考图1)，化学发光效果在1小时内显著优于Thermo公司的SuperSignal?West?Dura，30分钟内发光效果可达SuperSignal?West?Dura的约1.8-3.6倍，BeyoECL Star的4.2-6.9倍(参考图2)。

图1. BeyoECL Moon和Thermo公司SuperSignal West Dura及的BeyoECL Star的Western blot的检测效果对比图。Western检测过程中仅发光试剂不同，其余完全相同。图中可见，的BeyoECL?Star的检测灵敏度大约为SuperSignal West Dura的50%左右，而BeyoECL Moon的检测灵敏度与SuperSignal West Dura相当或略佳。

BeyoECL Moon的发光强度高。20微升25pg/μl辣根过氧化物酶标记IgG中，加入100微升的BeyoECL Moon工作液等三种不同的发光液后，在不同时间点通过化学发光仪(luminometer)检测化学发光。检测数据显示在1小时内BeyoECL?Moon的发光效果总是最强的，BeyoECL Star和SuperSignal West Dura的发光比较稳定，但发光强度要弱不少(图2)。

图2. BeyoECL Moon和Thermo公司SuperSignal West Dura以及的BeyoECL Star的检测效果对比。相同量的HRP-IgG?(500pg)，与发光试剂混合后至图中指定时间检测化学发光。图中可见BeyoECL?Moon在1小时内发光效果显著优于SuperSignal West Dura和BeyoECL Star。

BeyoECL?Moon的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量，以免获得过深的难以比较灰度的条带。
BeyoECL Moon非常稳定。BeyoECL Moon和BeyoECL Star一样，37℃水浴孵育30天，和4℃保存的试剂相比，对相同样品的检测效果无任何明显差异。
BeyoECL?Moon的背景很低，对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。PVDF膜(FFJP20/FFJP20/FFJP20/FFJP30/FFJP30/FFP39)和硝酸纤维素膜(FFN02/FFN03/FFN08)可以向订购。

包装清单：

产品编号

产品名称

包装

JP010018FM-1

BeyoECL Moon A液

250ml

JP010018FM-2

BeyoECL Moon B液

250ml

—

说明书

1份

保存条件：

4℃避光保存，一年有效。37℃避光保存，一个月内有效。如果长期不用，可以-20℃避光保存，这样可以保存更长时间。

注意事项：

BeyoECL Moon A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。
各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。特别是B液，含有氧化剂，比较容易被还原而失效。
BeyoECL?Moon的萤光持续时间很长，但开始反应后的20-30分钟内萤光更强一些，随后萤光会逐渐减弱，因此请注意充分利用这萤光较强的30分钟进行压片或成像。
当发现BeyoECL?Moon的检测灵敏度过高而影响检测效果时，可以选择检测灵敏度较低一些的BeyoECL Star (JP010018A)或
BeyoECL Plus (JP010018S)，或者减少样品、一抗或二抗的用量。
BeyoECL Moon A液和B液均对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

BeyoECL Moon (极超敏ECL化学发光试剂盒)

发表于由

产品编号

JP010018FS
BeyoECL Moon (极超敏ECL化学发光试剂盒)
100ml

415

JP010018FM
BeyoECL Moon (极超敏ECL化学发光试剂盒)
500ml

1352

生产的Western萤光检测试剂BeyoECL Moon是一种极超敏的以luminol为基础的ECL化学发光试剂盒，发光效果显著优于BeyoECL Star，可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样品。
生产的Western萤光检测试剂目前共有三种，分别是JP010018S/JP010018M BeyoECL Plus、JP010018AS/JP010018AM BeyoECL Star和JP010018FS/JP010018FM BeyoECL Moon。常规的Western检测，优先推荐使用BeyoECL Star。对于丰度比较高的目的蛋白的检测，例如内参蛋白等的检测，推荐使用性价比更高的BeyoECL Plus。对于低丰度较难检测的目的蛋白，优先推荐使用检测灵敏度最高的BeyoECL Moon。但对于丰度适中的目的蛋白的检测，不太推荐使用BeyoECL Moon，因为使用BeyoECL Moon时由于检测灵敏度特别高，容易产生过曝的现象。
BeyoECL Moon灵敏度极高，Western blot检测效果与Thermo公司SuperSignal West Dura相当或略佳(参考图1)，化学发光效果在1小时内显著优于Thermo公司的SuperSignal?West?Dura，30分钟内发光效果可达SuperSignal?West?Dura的约1.8-3.6倍，BeyoECL Star的4.2-6.9倍(参考图2)。

图1. BeyoECL Moon和Thermo公司SuperSignal West Dura及的BeyoECL Star的Western blot的检测效果对比图。Western检测过程中仅发光试剂不同，其余完全相同。图中可见，的BeyoECL?Star的检测灵敏度大约为SuperSignal West Dura的50%左右，而BeyoECL Moon的检测灵敏度与SuperSignal West Dura相当或略佳。

BeyoECL Moon的发光强度高。20微升25pg/μl辣根过氧化物酶标记IgG中，加入100微升的BeyoECL Moon工作液等三种不同的发光液后，在不同时间点通过化学发光仪(luminometer)检测化学发光。检测数据显示在1小时内BeyoECL?Moon的发光效果总是最强的，BeyoECL Star和SuperSignal West Dura的发光比较稳定，但发光强度要弱不少(图2)。

图2. BeyoECL Moon和Thermo公司SuperSignal West Dura以及的BeyoECL Star的检测效果对比。相同量的HRP-IgG?(500pg)，与发光试剂混合后至图中指定时间检测化学发光。图中可见BeyoECL?Moon在1小时内发光效果显著优于SuperSignal West Dura和BeyoECL Star。

BeyoECL?Moon的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量，以免获得过深的难以比较灰度的条带。
BeyoECL Moon非常稳定。BeyoECL Moon和BeyoECL Star一样，37℃水浴孵育30天，和4℃保存的试剂相比，对相同样品的检测效果无任何明显差异。
BeyoECL?Moon的背景很低，对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。PVDF膜(FFJP20/FFJP20/FFJP20/FFJP30/FFJP30/FFP39)和硝酸纤维素膜(FFN02/FFN03/FFN08)可以向订购。

包装清单：

产品编号

产品名称

包装

JP010018FS-1

BeyoECL Moon A液

50ml

JP010018FS-2

BeyoECL Moon B液

50ml

—

说明书

1份

保存条件：

4℃避光保存，一年有效。37℃避光保存，一个月内有效。如果长期不用，可以-20℃避光保存，这样可以保存更长时间。

注意事项：

BeyoECL Moon A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。
各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。特别是B液，含有氧化剂，比较容易被还原而失效。
BeyoECL?Moon的萤光持续时间很长，但开始反应后的20-30分钟内萤光更强一些，随后萤光会逐渐减弱，因此请注意充分利用这萤光较强的30分钟进行压片或成像。
当发现BeyoECL?Moon的检测灵敏度过高而影响检测效果时，可以选择检测灵敏度较低一些的BeyoECL Star (JP010018A)或
BeyoECL Plus (JP010018S)，或者减少样品、一抗或二抗的用量。
BeyoECL Moon A液和B液均对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

BeyoECL Star (特超敏ECL化学发光试剂盒)

发表于由

产品编号

JP010018AFT
BeyoECL Star (特超敏ECL化学发光试剂盒) (试用装)
20ml

JP010018AS
BeyoECL Star (特超敏ECL化学发光试剂盒)
100ml

356

JP010018AM
BeyoECL Star (特超敏ECL化学发光试剂盒)
500ml

1166

生产的Western萤光检测试剂BeyoECL Star是一种特超敏ECL化学发光试剂盒，发光效果显著优于BeyoECL Plus，可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样品。
生产的Western萤光检测试剂目前共有三种，分别是JP010018S/JP010018M BeyoECL Plus、JP010018AS/JP010018AM BeyoECL Star和JP010018FS/JP010018FM BeyoECL Moon。常规的Western检测，优先推荐使用BeyoECL Star。对于丰度比较高的目的蛋白的检测，例如内参蛋白等的检测，推荐使用性价比更高的BeyoECL Plus。对于低丰度较难检测的目的蛋白，优先推荐使用检测灵敏度最高的BeyoECL Moon。但对于丰度适中的目的蛋白的检测，不太推荐使用BeyoECL Moon，因为使用BeyoECL Moon时由于检测灵敏度特别高，容易产生过曝的现象。
BeyoECL Star灵敏度极高，比DAB显色的灵敏度至少高1000倍，比Amersham公司的ECL或以前生产的BeyoECL的灵敏度高100-500倍左右，比生产的BeyoECL?Plus的灵敏度高约5-10倍(参考图1)，比原Pierce公司(现Thermo公司)的SuperSignal West Pico Substrate的灵敏度高10倍以上，实际检测效果与原Pierce公司的SuperSignal West Dura和SuperSignal West Femto的检测灵敏度相近。对于辣根过氧化物酶的最低检测灵敏度可以达到飞克级，500飞克辣根过氧化物酶用BeyoECL Star检测并用化学发光仪进行发光强度的定量检测时，信噪比大于5。

图1. BeyoECL Star和BeyoECL Plus的检测效果对比图。Western检测过程中仅发光试剂不同，其余完全相同。

BeyoECL Star的发光时间更长。在10微升1-10纳克/微升辣根过氧化物酶标记IgG中，加入100微升的 BeyoECL Star工作液后在不同时间点通过化学发光仪(luminometer)检测化学发光。检测数据显示20分钟后发光无明显减弱， 60分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约85%左右，120分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约70%左右(参考图2)。

图2. BeyoECL Star检测不同剂量HRP-IgG，20分钟后发光效果几乎不变，120分钟后发光效果仍然良好。

BeyoECL Star的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量，以免获得过深的难以比较灰度的条带。
BeyoECL Star非常稳定。BeyoECL Star和BeyoECL Plus一样，37℃水浴孵育30天，和4℃保存的试剂相比，对相同样品的检测效果无任何明显差异。
BeyoECL Star的背景很低，对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。PVDF膜(FFJP30/FFP39)和硝酸纤维素膜(FFN03)可以向订购。
包装清单：

产品编号

产品名称

包装

JP010018AS-1

BeyoECL Star A液

50ml

JP010018AS-2

BeyoECL Star B液

50ml

—

说明书

1份

产品编号

产品名称

包装

JP010018AM-1

BeyoECL Star A液

250ml

JP010018AM-2

BeyoECL Star B液

250ml

—

说明书

1份

保存条件：
4℃避光保存，一年有效。37℃避光保存，一个月有效。如果长期不用，可以-20℃避光保存。-20℃可以保存更长时间。
注意事项：
BeyoECL Star A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。
各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。特别是B液，含有氧化剂，比较容易被还原而失效。
BeyoECL Star的萤光持续时间很长，但开始反应后的20-30分钟内萤光更强一些，随后萤光会逐渐减弱，因此请注意充分利用这萤光较强的30分钟进行压片。
当发现BeyoECL Star的检测灵敏度过高而影响检测效果时，可以选择检测灵敏度较低一些的BeyoECL Plus (JP010018S/M)，或者减少样品、一抗或二抗的用量。如果BeyoECL Star的检测灵敏度仍然不够时，可以选择检测灵敏度更高的BeyoECL Moon (JP010018FS/M)。
BeyoECL Star A液和B液均对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

BeyoECL Star (特超敏ECL化学发光试剂盒) (试用装)

发表于由

产品编号

JP010018AFT
BeyoECL Star (特超敏ECL化学发光试剂盒) (试用装)
20ml

JP010018AS
BeyoECL Star (特超敏ECL化学发光试剂盒)
100ml

356

JP010018AM
BeyoECL Star (特超敏ECL化学发光试剂盒)
500ml

1166

生产的Western萤光检测试剂BeyoECL Star是一种特超敏ECL化学发光试剂盒，发光效果显著优于BeyoECL Plus，可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)发生化学反应，发出萤光，从而可以通过用X光片压片或其它适当化学发光成像设备检测样品。
生产的Western萤光检测试剂目前共有三种，分别是JP010018S/JP010018M BeyoECL Plus、JP010018AS/JP010018AM BeyoECL Star和JP010018FS/JP010018FM BeyoECL Moon。常规的Western检测，优先推荐使用BeyoECL Star。对于丰度比较高的目的蛋白的检测，例如内参蛋白等的检测，推荐使用性价比更高的BeyoECL Plus。对于低丰度较难检测的目的蛋白，优先推荐使用检测灵敏度最高的BeyoECL Moon。但对于丰度适中的目的蛋白的检测，不太推荐使用BeyoECL Moon，因为使用BeyoECL Moon时由于检测灵敏度特别高，容易产生过曝的现象。
BeyoECL Star灵敏度极高，比DAB显色的灵敏度至少高1000倍，比Amersham公司的ECL或以前生产的BeyoECL的灵敏度高100-500倍左右，比生产的BeyoECL?Plus的灵敏度高约5-10倍(参考图1)，比原Pierce公司(现Thermo公司)的SuperSignal West Pico Substrate的灵敏度高10倍以上，实际检测效果与原Pierce公司的SuperSignal West Dura和SuperSignal West Femto的检测灵敏度相近。对于辣根过氧化物酶的最低检测灵敏度可以达到飞克级，500飞克辣根过氧化物酶用BeyoECL Star检测并用化学发光仪进行发光强度的定量检测时，信噪比大于5。

图1. BeyoECL Star和BeyoECL Plus的检测效果对比图。Western检测过程中仅发光试剂不同，其余完全相同。

ECL Star的发光时间更长。在10微升1-10纳克/微升辣根过氧化物酶标记IgG中，加入100微升的 BeyoECL Star工作液后在不同时间点通过化学发光仪(luminometer)检测化学发光。检测数据显示20分钟后发光无明显减弱， 60分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约85%左右，120分钟后发光强度减弱至初始发光强度的约70%左右(参考图2)。

图2. BeyoECL Star检测不同剂量HRP-IgG，20分钟后发光效果几乎不变，120分钟后发光效果仍然良好。

BeyoECL Star的高灵敏度可以大大节省宝贵的样品以及非常昂贵的一抗和二抗的用量。同时必须注意适当减少一抗和二抗或样品的用量，以免获得过深的难以比较灰度的条带。
BeyoECL Star非常稳定。BeyoECL Star和BeyoECL Plus一样，37℃水浴孵育30天，和4℃保存的试剂相比，对相同样品的检测效果无任何明显差异。
BeyoECL Star的背景很低，对PVDF膜和硝酸纤维素膜均适用。PVDF膜(FFJP30/FFP39)和硝酸纤维素膜(FFN03)可以向订购。
包装清单：

产品编号

产品名称

包装

JP010018AFT-1

BeyoECL Star A液

10ml

JP010018AFT-2

BeyoECL Star B液

10ml

—

说明书

1份

产品编号

产品名称

包装

JP010018AS-1

BeyoECL Star A液

50ml

JP010018AS-2

BeyoECL Star B液

50ml

—

说明书

1份

产品编号

产品名称

包装

JP010018AM-1

BeyoECL Star A液

250ml

JP010018AM-2

BeyoECL Star B液

250ml

—

说明书

1份

保存条件：
4℃避光保存，一年有效。37℃避光保存，一个月有效。如果长期不用，可以-20℃避光保存。-20℃可以保存更长时间。
注意事项：
BeyoECL Star A液和B液在吸取过程中必须要更换枪头，A液和B液相互污染后会导致A液或B液逐渐失效，影响后续的使用效果。
各溶液使用后，请盖紧瓶盖，以防失效。特别是B液，含有氧化剂，比较容易被还原而失效。
BeyoECL Star的萤光持续时间很长，但开始反应后的20-30分钟内萤光更强一些，随后萤光会逐渐减弱，因此请注意充分利用这萤光较强的30分钟进行压片。
当发现BeyoECL Star的检测灵敏度过高而影响检测效果时，可以选择检测灵敏度较低一些的BeyoECL Plus (JP010018S/M)，或者减少样品、一抗或二抗的用量。如果BeyoECL Star的检测灵敏度仍然不够时，可以选择检测灵敏度更高的BeyoECL Moon (JP010018FS/M)。
BeyoECL Star A液和B液均对人体有害，操作时请小心，并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

Superstar飞克超敏ECL化学发光试剂盒 500ml,常用生化试剂

发表于由

Superstar飞克超敏ECL化学发光试剂盒 500ml品牌：JinPan | 货号：EK-5008-500ml

ECL Western Blotting Substrate

【保存条件】 

4℃避光保存 12 月 

【概述】

 超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP 的抗体及其关联的抗原。 用于 HRP 标记抗体的 Western Blot 和 HRP 标记探针的核酸杂交。由于采用了独特的发光底物 系统，SuperStar ECL 超敏发光液是目前最灵敏的商业化荧光 ECL 检测试剂（具有极高灵 敏度和高信噪比）；可在日光灯下进行发光操作；发光迅速，荧光可使 X 光胶片感光达 12 小时以上，特别适用于痕量蛋白或核酸检测；可使用更高的抗体稀释倍数(1:2000～1:10000)， 极其节省抗体。

 【特点】 

 飞克级灵敏度 – 在硝酸纤维素或 PVDF 膜上检测低至飞克量的目标蛋白量 

 高信号稳定性 – 孵育印迹在关键的 4 小时时间内提供稳定的信号持续时间，在最佳条 件下可产生长达 24 小时的光输出 

 稳定的试剂 – 8 小时工作溶液稳定性; 在 4℃下 1 年的试剂盒稳定性 

 更经济的抗体用量： 0.2 至 1.0μg/ mL 一抗（从 1 mg / mL 原液中 1：1000 至 1：5000 稀释） 10 至 50 ng / mL 二级抗体（从 1 mg / mL 原液中 1：20,000 至 1：100,000 稀释） 

【操作方法】 

1. 执行常规 SDS-PAGE、转膜和 Western Blot 步骤。注意用 HRP 标记 lgG 或用一抗-链 亲和素-生物素-HRP 夹法。

2. Western Blot 最后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液：分别取 A:B=1:1 混合（如需要 1ml 发光液则取 500ul ECL A 液和 500ul ECL B 液混合），放入干净容器中混合。建议立即使用 工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。

 3. 用镊子取出膜，搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。将膜完全浸入发光工作液 (0.125ml 发光工作液/cm2 膜)中，与发光工作液充分接触。室温孵育 2 分钟，准备立即压片 曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度，有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促 反应，使用过少的发光工作液不利反应进行，也会导致膜上条带曝光不均和明显降低灵敏度。 为达节约目的可将 膜剪小但勿降低发光液用量。

 4. 用镊子夹起膜，搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。

 5. 打开 X 光胶片暗盒，在暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将 Western Blot 膜贴在 保鲜膜上，将保鲜膜折起来完全包裹 Western Blot 膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余 的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖 Western Blot 膜的保鲜膜固定在暗 盒内，蛋白带面向上。

 6. 暗房内压 X 光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。

 【注意事项】 

1. 步骤 1～5 可在日光灯下操作;但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低，移 到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。

2. 长时间曝光或蛋白过量，将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带 模糊。

3. 发光工作液孵育约 2 分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见，低丰度蛋 白条带 发光较弱甚至肉眼不可见但可使 X 光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发 光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使 X 光胶片感光，因而弱带可曝光 1-10 小 时。如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用 ECL 发光和 曝光。

4. 由于超敏发光液极其灵敏，强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗 1:1000～1:4000， 二抗 1:2000～1:5000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带，导致失败。

5. 某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜。 

6. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带 的位置和大小。

7. NaN3能抑制 HRP 活性，回收第二抗体应避免使用 NaN3，如必需使用勿超过 0.01%。

本网站可提供的所有产品和服务均不得用于人体或动物的临床诊断或治疗，仅可用于科研等非医疗目的。

Superstar飞克超敏ECL化学发光试剂盒,常用生化试剂

发表于由

Superstar飞克超敏ECL化学发光试剂盒品牌：JinPan | 货号：EK-5008-100ml

ECL Western Blotting Substrate

【保存条件】 

4℃避光保存 12 月 

【概述】

 超敏发光液用于检测直接或间接标记辣根过氧化物酶 HRP 的抗体及其关联的抗原。 用于 HRP 标记抗体的 Western Blot 和 HRP 标记探针的核酸杂交。由于采用了独特的发光底物 系统，SuperStar ECL 超敏发光液是目前最灵敏的商业化荧光 ECL 检测试剂（具有极高灵 敏度和高信噪比）；可在日光灯下进行发光操作；发光迅速，荧光可使 X 光胶片感光达 12 小时以上，特别适用于痕量蛋白或核酸检测；可使用更高的抗体稀释倍数(1:2000～1:10000)， 极其节省抗体。

 【特点】 

 飞克级灵敏度 – 在硝酸纤维素或 PVDF 膜上检测低至飞克量的目标蛋白量 

 高信号稳定性 – 孵育印迹在关键的 4 小时时间内提供稳定的信号持续时间，在最佳条 件下可产生长达 24 小时的光输出 

 稳定的试剂 – 8 小时工作溶液稳定性; 在 4℃下 1 年的试剂盒稳定性 

 更经济的抗体用量： 0.2 至 1.0μg/ mL 一抗（从 1 mg / mL 原液中 1：1000 至 1：5000 稀释） 10 至 50 ng / mL 二级抗体（从 1 mg / mL 原液中 1：20,000 至 1：100,000 稀释） 

【操作方法】 

1. 执行常规 SDS-PAGE、转膜和 Western Blot 步骤。注意用 HRP 标记 lgG 或用一抗-链 亲和素-生物素-HRP 夹法。

2. Western Blot 最后一次洗膜的同时新鲜配制发光工作液：分别取 A:B=1:1 混合（如需要 1ml 发光液则取 500ul ECL A 液和 500ul ECL B 液混合），放入干净容器中混合。建议立即使用 工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵敏度略有降低。

 3. 用镊子取出膜，搭在滤纸上沥干洗液但勿使膜完全干燥。将膜完全浸入发光工作液 (0.125ml 发光工作液/cm2 膜)中，与发光工作液充分接触。室温孵育 2 分钟，准备立即压片 曝光。孵育时间过长不会增加灵敏度，有时还会导致曝光条带异常。发光过程的本质是酶促 反应，使用过少的发光工作液不利反应进行，也会导致膜上条带曝光不均和明显降低灵敏度。 为达节约目的可将 膜剪小但勿降低发光液用量。

 4. 用镊子夹起膜，搭在滤纸上沥干发光工作液。但勿洗去发光液。

 5. 打开 X 光胶片暗盒，在暗盒内表面铺一张面积大于膜的保鲜膜。将 Western Blot 膜贴在 保鲜膜上，将保鲜膜折起来完全包裹 Western Blot 膜，去除气泡和皱褶，可剪去边缘部多余 的保鲜膜。用滤纸吸去多余的发光工作液。用胶带将覆盖 Western Blot 膜的保鲜膜固定在暗 盒内，蛋白带面向上。

 6. 暗房内压 X 光胶片，分别曝光不同的时间如数秒到数分钟。显影冲洗。

 【注意事项】 

1. 步骤 1～5 可在日光灯下操作;但发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能略有降低，移 到暗房操作可避免之。戴手套可以避免在膜上留下手印。

2. 长时间曝光或蛋白过量，将加深背景并使条带强弱变化失去线性关系。曝光不足则条带 模糊。

3. 发光工作液孵育约 2 分钟后膜上的条带发光。强条带发光在暗房中肉眼可见，低丰度蛋 白条带 发光较弱甚至肉眼不可见但可使 X 光胶片曝光。不能简单以肉眼观察判断条带发 光时间。肉眼不可见的荧光实际上可持续数小时并使 X 光胶片感光，因而弱带可曝光 1-10 小 时。如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用 ECL 发光和 曝光。

4. 由于超敏发光液极其灵敏，强烈推荐大多数进口抗体起始浓度为一抗 1:1000～1:4000， 二抗 1:2000～1:5000。抗体浓度过高将造成高背景或没有条带，导致失败。

5. 某些保鲜膜包裹印迹膜时可能会淬灭荧光，应选择高质量保鲜膜。 

6. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带 的位置和大小。

7. NaN3能抑制 HRP 活性，回收第二抗体应避免使用 NaN3，如必需使用勿超过 0.01%。

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