属性
包装
pkg of (Kit contains reagents for 5 conjugations.)
荧光
λex 495 nm; λem 525 nm
储存温度
2-8°C
说明
应用
Flourotag FITC 偶联试剂盒可以用于流式细胞仪免疫组织化学和免疫细胞化学。它还可以用于FITC和多肽激素，细胞活素，生长因子和蛋白质偶联。
特点和优势
适于少量(1 mg)和大量(5 mg)偶联物。
完整水相法 – 不需要DMF
从过量的FITC快速凝胶过滤分离偶联物
偶联物和F/P比测定完整实验方案
试剂足够至少进行5次5mg蛋白质的偶联反应，可供在扩大化前确定最佳F/P比。
应用和实验方案参考
原理
Sigma提供方便的试剂盒用于制备FITC-标记抗体。异硫氰基荧光素（FITC），异构体1，是一种广泛使用的荧光团，因为在共轭反应时它有高量子效率和稳定性。FITC具有黄橘色的颜色以及在495 nm处的最大吸光值。通过激发，它可以散发出在525 nm具有最大发射的黄绿色。通过蛋白质或多肽链的自由氨基基团发生共轭反应，形成稳定的硫脲键（看反应）。FITC和抗体，凝集素，激素和生长因子共轭，用于各种免疫组织化学和流式细胞仪实验中。该实验方案对于抗体是最优方案，但用于其他蛋白质时需要用户自行修改。
分析说明
过程
1.在碳酸盐-重碳酸盐缓冲液中溶解蛋白质和FITC。
2.边搅拌边缓慢将FITC加入蛋白质。盖上箔片，在室温下搅拌2小时。
3.在G-25柱上将自由FITC和偶联物分开。收集组分。
4.收集含有偶联物的组分。
5.分光光度法确定F/P偶联物比例。
6.用1%牛血清白蛋白和0.1%叠氮钠稳定，0-5℃储存。
