细菌基因组DNA提取试剂盒100T,常用生化试剂

细菌基因组DNA提取试剂盒100T品牌:JinPan | 货号:EK-1208-100T 操作步骤:
1. 取200μl细菌菌液(最多不超过1×109cells)于无酶1.5ml离心管中。
2. 10000×g离心1min或3000×g离心5min收集细菌沉淀。
3. 加入200μl无菌PBS将细菌重悬。
注意:为尽可能减少LB等细菌培养基对提取过程中的影响,可重复步骤2-3一次。
4. 加入30μlLysozyme Solution至溶液中,充分涡旋混匀15-20s后37℃孵育15-30min。
5. (可选)加入5μl RNaseASolution(20mg/ml,自备)至消化液中,颠倒混匀,室温或37℃放置5-10min。
6. 将所得溶液加入200μl Buffer BB并充分混匀,加入20μl ProteinaseK Solution后立即混匀,彻底混匀后置于70℃水浴中孵育10min。
7. 将溶液从水浴中取出,并加入100μl异丙醇充分混匀。
8. 于13000×g离心5min,离心结束后取上清溶液加入核酸吸附柱(提前套在2ml收集管中)。
9. 以8000×g离心1min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
10. 向吸附柱中加入500μl Buffer IRB,8000×g离心1min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
11. 向吸附柱中加入500μl Buffer WB(已加入无水乙醇),8000×g离心1min,倒掉收集管中的废液,将吸附柱放回收集管中。
12. 重复操作步骤11一次。
13. 倒掉收集管中的废液后将吸附柱再次套入收集管中,最大转速 (~13,400×g)离心2min以除尽Buffer WB。将吸附柱套入新的1.5ml无酶离心管中并置于室温放置5-10min彻底晾干乙醇。
注意:Buffer WB中的乙醇残留会影响后续的酶反应实验。
14. 向吸附柱膜中间位置悬空滴加50-100μl BufferEB,室温静置2min后,最大转速(~13,400×g)离心2min收集核酸溶液。丢弃柱子,盖上EP管盖子置于-20℃保存。
注意:洗脱体积不应小于30μl,体积过少会影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。为了提高DNA的回收量,可将BufferEB加热(约60℃)并洗脱两次,可增加约15-20%得率。

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1M DTT溶液(DNase, RNase & Protease free),常用生化试剂

1M DTT溶液(DNase, RNase & Protease free)品牌:JinPan | 货号:JP-8187-5ml

1M DTT Solution (DNase, RNase & Protease free)

【保存条件】 

-20℃避光保存一年 

【概述】 

DTT即DL-Dithiothreitol,中文名为二硫苏糖醇。分子式为C4H10O2S2,分子量为154.25, 本产品原料为进口原料,不含 DNA 酶、RNA 酶和蛋白酶(DNase, RNase & Protease free), 纯度>99%。干燥失重低于 0.5%,氧化 DTT 含量低于 0.5%。 

DTT 是常用还原剂,有抗氧化作用。DTT 和巯基乙醇相比,作用相似,但 DTT 的刺激性气味要小很多,毒性也比巯基乙醇低很多。而且 DTT 比巯基乙醇的浓度低 7 倍时,两者 效果相近。 本品浓度为 1mol/L。 

【注意事项】 

1. DTT 对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。 

2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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10×Tris-EDTA pH8.0 缓冲液(无菌,无DNA/RNA酶),常用生化试剂

10×Tris-EDTA pH8.0 缓冲液(无菌,无DNA/RNA酶)品牌:JinPan | 货号:JP-8086-100ml

100×TE buffer(pH8.0)

【保存条件】 

室温保存,有效期 1 年 

【概述】 

TE 缓冲液是分子生物学中常用的缓冲液,尤其是 DNA、cDNA 或 RNA 的缓冲液。TE 缓冲液由 Tris 和 EDTA 组成,pH 值为 8.0,经过 DEPC 及灭菌处理。本产品用于溶解 DNA 或 RNA,同时保护其不被降解。本产品为 10×TE 缓冲液,需稀释成 1×使用。 

【使用建议】 

本产品为 10×TE 缓冲液,需稀释成 1×使用。如:100ml 10×TE 缓冲液加入 900ml 无菌 无酶 ddH2O 搅拌混匀成 1×TE 缓冲液工作液。 

【注意事项】 

1. 仅限于科研使用,不可用于各种食品药品或临床治疗中。 

2. 为了您的安全与健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

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